2024/9/24 15:07:00

菌种保藏是微生物学中的一项重要技术,旨在通过创造特定的环境条件来延长菌种的存活时间并保持其遗传稳定性。以下是菌种保藏的常见方法汇总:

1. 斜面低温保藏法

方法:将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,放入2-8℃的冰箱中保藏。

特点:

优点:操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。

缺点:保藏时间短,需经常传代,易变异、污染,且培养基易干枯、菌体易自溶。

 

2. 液体石蜡覆盖保藏法

方法:在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,以防止水分蒸发和氧气进入,从而延长保藏时间。

特点:

优点:制作简单,不需特殊设备,且不需经常移种。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上,酵母菌可保藏1-2年,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右。

缺点:保存时必须直立放置,所占位置较大,同时也不便携带。从液体石蜡下面取培养物移种后,接种环在火焰上烧灼时,培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅。

 

3. 载体保藏法

方法:将微生物吸附在适当的载体上,如土壤、沙子、硅胶、滤纸等,然后进行干燥保藏。

具体类型:

沙土保藏法:适用于产孢子的微生物,如放线菌、芽孢菌和某些真菌。

滤纸保藏法:细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。

特点:简便易行,不需要特殊设备,且保藏时间较长。

 

4. 冷冻保藏法

方法:利用低温环境来抑制微生物的代谢活动,从而延长其存活时间。根据温度的不同,可分为低温冰箱(-20℃至-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

特点:

优点:保藏时间长,适用于各种微生物的较长期保藏。

缺点:需要特殊的冷冻设备和保护剂,且操作相对复杂。

 

5. 冷冻干燥保藏法

方法:先使微生物在极低温度下快速冷冻,然后在减压条件下利用升华现象除去水分,使培养物干燥。

特点:

优点:是目前最好的保藏方法之一,适用于各种微生物,便于大量保藏,菌种存活时间长。

缺点:需要特殊的冷冻干燥设备和保护剂,且操作复杂。

 

6. 甘油管保存法

方法:将微生物悬浮在含有甘油的溶液中,然后密封保存在低温条件下。

特点:简便易行,适用于多种微生物的短期至中期保藏。

 

7. 寄主保藏法

方法:用于尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代。

特点:相当于一般微生物的传代培养保藏法,但操作更为复杂。

 

综上所述,菌种保藏的方法多种多样,各有优缺点。在选择保藏方法时,应根据微生物的种类、保藏时间的长短以及实验室的具体条件来综合考虑。

 

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