点击直接下载软件:ELISACalc.rar
ELISA 标准曲线可采用不同的绘图软件来绘制 ,我公司推荐使用的“ELISACalc”软件,以双抗夹心法的一组数据为例,绘制方法如下 :
1、在EXCEL表格中整理一组包括标曲和样本数据。
标准品 |
样本OD值 |
|||
浓度pg/ml |
OD值 |
|||
0 |
0.0323 |
0.5227 |
0.5287 |
0.6105 |
156 |
0.1004 |
0.6302 |
0.6404 |
0.875 |
312 |
0.2003 |
0.4723 |
0.4829 |
0.4271 |
625 |
0.3464 |
0.4992 |
0.5065 |
0.9242 |
1250 |
0.5472 |
0.6473 |
0.6524 |
1.2026 |
2500 |
0.8945 |
0.4999 |
0.5069 |
0.8086 |
5000 |
1.3647 |
1.2535 |
1.2665 |
0.9042 |
10000 |
1.9448 |
1.5922 |
1.5855 |
0.8102 |
2、打开软件ELISACalc,复制表格中底色填充为粉色的数据,点击软件中的“粘贴”按钮,如图:
3、左上角优先选择四参数拟合曲线,点击“回归/拟合”模型,得到如下曲线图:
4、曲线应为平滑上升趋势,r2值越接近 1 拟合度越好。如果四参数模型不理想可以换成其他的模型。依次点击“回归方程”“复制”,可以把方程粘贴到表格中。
5、点击“由Y计算X”,复制表格中的样本吸光值即底色为黄色的数据,在软件中点击“粘贴”“计算”。即可得到对应的样本蛋白浓度值。
6、点击“复制”,即可把得到的浓度值粘贴到表格中。整理数据,再乘以稀释倍数,得到对应样本蛋白最终浓度值。
ELISACalc软件与CurveExpert相比较,能选取的拟合模型种类较少,优点是操作简单,可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴,计算大批量数据时有明显优势。