知识库
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WB的定量结果必须要归一化处理吗？
在Western Blot（WB）实验中，定量结果的归一化处理是非常必要的。归一化是实验数据处理的关键步骤，它有助于消除样本间或实验中的偏差，确保实验结果的可靠性和可比性。WB实验的定量结果必须要进行归一化处理。通过选择合适的归一化方法，可以消除实验中的偏差，提高实验结果的可比性和说服力。在实际操
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WB之SDS作用解析
在Western Blot（WB）实验中，定量结果的归一化处理是非常必要的。归一化是实验数据处理的关键步骤，它有助于消除样本间或实验中的偏差，确保实验结果的可靠性和可比性。WB实验的定量结果必须要进行归一化处理。通过选择合适的归一化方法，可以消除实验中的偏差，提高实验结果的可比性和说服力。在实际操
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DNA凝胶回收常见问题
DNA凝胶回收是分子生物学实验中常见的步骤，用于从琼脂糖凝胶中分离和纯化特定的DNA片段。然而，在进行DNA凝胶回收时，可能会遇到一些常见问题，这些问题会影响回收的效率和结果。DNA凝胶回收过程中遇到的问题多种多样，但大多数问题都可以通过仔细操作、遵循实验步骤和注意事项来解决。在进行DNA凝胶回收
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甘油菌种复苏保存步骤技巧与注意事项
甘油菌种复苏保存的步骤、技巧与注意事项涉及多个方面，选择对数生长期的菌种，此时菌种生长旺盛，代谢活跃，有利于后续的保存效果。将菌种接种于LB液体培养基或其他适宜的液体培养基中，培养至体系内浑浊可见。准备50%浓度的甘油溶液，可通过等体积的蒸馏水和甘油混合得到。由于纯甘油十分粘稠，难以定量
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全蛋白的提取方法和注意事项
全蛋白的提取方法和注意事项是实验过程中的关键环节，它们直接影响到后续实验结果的准确性和可靠性。在进行全蛋白提取时，需要注意以下几点以确保实验结果的准确性和可靠性：1.低温操作：整个提取过程应尽量在低温下进行（如4℃），以防止蛋白的降解和变性。2.蛋白酶抑制剂：在裂解液中加入适量的蛋白酶抑
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WB实验里，蛋白可以提完后面再跑吗
在WB（Western Blotting，蛋白质印迹）实验中，蛋白的提取与后续的电泳、转膜、显色等步骤是相对独立的，因此蛋白在提取后是可以暂时保存，并在后续时间点再进行电泳等后续实验的。WB实验中蛋白可以提完后面再跑，但需要注意保存条件和保存时间，以确保蛋白的稳定性和活性。同时，在后续实验中应控制各步
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是先调pH后定容，还是先定容后调pH
在实验室操作中，关于溶液的pH调整和定容的顺序，一般遵循“先调pH后定容”的原则。在进行溶液配制时，应先根据实验需求计算出所需的溶质和溶剂的量，然后将溶质溶解在适量的溶剂中。接着，使用酸碱调节剂（如盐酸、氢氧化钠等）逐步调整溶液的pH至所需值。最后，将溶液定容至所需体积。这样可以确保溶液的
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WB 提前配胶 VS 现配现用
在Western Blot（WB）实验中，凝胶的制备是一个至关重要的步骤，它直接影响到实验结果的准确性和条带的清晰度。关于凝胶的制备方式，实验室中常见的有两种：提前配胶和现配现用。这两种方法各有其优缺点，选择哪种方式往往取决于实验的具体需求和实验人员的偏好。同时，无论选择哪种方法，都应注意凝
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808 nm无重原子光敏剂
808 nm无重原子光敏剂是一类在生物医学、材料科学等领域具有广泛应用前景的化合物。它们的主要特点是不含有重金属元素（如铂、铱、钌等），因此具有较低的毒性和更好的生物相容性。随着对无重原子光敏剂研究的不断深入，科学家们不断开发出新型的无重原子光敏剂，并探索其在各个领域的应用。随着技术的
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检测抗原反应性T细胞，你用对指标设对门控了么？
在检测抗原反应性T细胞时，选择合适的指标和设置正确的门控是至关重要的，以确保实验结果的准确性和可靠性。1.选择合适的刺激物：根据实验目的选择合适的抗原或刺激物来激活T细胞。对于特异性抗原反应性T细胞的检测，应使用能够特异性识别并结合抗原的刺激物。2.优化实验条件：在实验过程中应注意优化
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DTA在分子生物学中的应用
EDTA（乙二胺四乙酸）是一种有机化合物，常温常压下为白色粉末，能溶于氢氧化钠、碳酸钠及氨溶液中，微溶于冷水，不溶于醇及一般有机溶剂。EDTA分子中含有两个氨基（-NH2）和四个羧基（-COOH）。这两个氨基提供了两个氮原子作为配位原子，而四个羧基则提供了四个氧原子作为配位原子，共计六个配位原子
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海藻糖在分子生物学中的用途
海藻糖，又称为α,α-海藻糖或α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡萄糖苷，是由两个葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的非还原性双糖。这种双糖分子因其独特的物理化学性质和生物活性，在分子生物学领域引起了广泛关注。本文将深入探讨海藻糖在生物制品稳定、基因工程、细胞保护以及实验技术优化等方面的应用
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细胞培养小室PC膜和PET膜该怎么选
PC膜材质的细胞共培养小室和PET膜材质的细胞小室是常见的用于细胞培养的 耗材，它们在材质特点、透气性、透光性、实验应用以及其他特性等方面存在一些区别。PC膜材质的细胞共培养小室和PET膜材质的细胞小室在材质特点、透气性、透光性、实验应用以及其他特性等方面存在差异。在选择时，应考虑实验的具体
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菌种保藏的常见方法汇总
菌种保藏是微生物学中的一项重要技术，旨在通过创造特定的环境条件来延长菌种的存活时间并保持其遗传稳定性。菌种保藏的方法多种多样，各有优缺点。在选择保藏方法时，应根据微生物的种类、保藏时间的长短以及实验室的具体条件来综合考虑。
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RT-qPCR检测的一步法与两步法及其优缺点
RT-qPCR（Quantitative Reverse Transcription PCR，即定量逆转录PCR）是一种常用于基因表达分析、RNA干扰验证、病原体检测等分子生物学应用的实验方法。在RT-qPCR中，RNA首先通过逆转录酶转录成cDNA，随后以cDNA为模板进行qPCR反应。RT-qPCR可以通过一步法或两步法来完成，一步法RT-qPCR和两步
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M1型和M2型极化的巨噬细胞有什么不同
M1型和M2型极化的巨噬细胞在多个方面存在显著差异，这些差异主要体现在功能、细胞因子分泌、表面标志物、代谢途径以及它们在疾病中的作用等方面。M1型和M2型极化的巨噬细胞在功能、细胞因子分泌、表面标志物、代谢途径以及疾病中的作用等方面存在显著差异。这些差异使得巨噬细胞能够根据不同的生理和病
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哪些因素可以诱导巨噬细胞向M2型极化呢
还有一些其他因素也可能影响巨噬细胞向M2型极化，如共培养系统（将巨噬细胞与其他细胞类型如T细胞、树突状细胞等进行共培养）和脂多糖（LPS）处理（虽然LPS通常用于诱导M1型极化，但在某些条件下也可能促进M2型极化）。然而，这些因素的具体作用机制和效果可能因实验条件和细胞类型的不同而有所差异
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哪些因素可以诱导巨噬细胞向M1型极化呢
核因子κB（NF-κB）、信号转导子和转录激活子（STAT）等转录因子的激活在巨噬细胞向M1型极化过程中发挥重要作用。这些转录因子能够调控相关基因的表达，促进巨噬细胞向M1型极化。诱导巨噬细胞向M1型极化的因素主要包括细胞因子（如IFN-γ、TNF-α、LPS等）、微生物及其产物以及环境刺激等。这些因素通过
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体外诱导巨噬细胞极化的方法都有哪些？
体外诱导巨噬细胞极化的方法多种多样，主要依赖于不同的细胞来源和诱导因子。需要注意的是，不同的细胞来源和诱导因子可能会对巨噬细胞极化的效果和特性产生影响。因此，在进行体外诱导巨噬细胞极化实验时，应根据具体实验目的和条件选择合适的细胞来源和诱导因子。同时，还需要注意实验操作的规范性和
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蛋白定量的3种常用方法
蛋白定量，即蛋白质定量，是生物学实验中不可或缺的一部分，用于确定蛋白质的含量。在酸性溶液中，考马斯亮蓝G250染料与蛋白质中的碱性氨基酸（如精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合，导致染料的最大吸收峰位置从488nm变为595nm，颜色从棕红色变为蓝色。结合到蛋白质分子上的染料数与蛋白质所带正电荷成
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高碘酸和过碘酸有啥区别？
高碘酸：具有很强的氧化性，能将多种有机化合物氧化，例如可以将邻二醇氧化成醛或酮等。在氧化过程中，高碘酸自身被还原为碘酸或其他含碘化合物。过碘酸：同样具有强氧化性，但在某些反应中的氧化能力和选择性可能与高碘酸略有不同。例如，在对特定有机化合物的氧化反应中，过碘酸可能表现出不同的反应速率
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盘点几种常见的细胞核染料，你了解多少？
在生物学和医学研究中，细胞核染料是常用的实验工具，它们能够特异性地染色细胞核，帮助研究者观察和分析细胞的形态、结构和功能。类型：Hoechst染料是一类非嵌入式荧光染料，可以穿透活细胞的细胞膜，与DNA结合后发出蓝色荧光。常见种类：主要包括Hoechst 33258和Hoechst 33342。两者在功能上相似，但
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分子克隆和细胞转染之间的区别是什么
分子克隆和细胞转染是生物学研究中的两个重要过程，它们之间存在明显的区别，主要体现在目的、操作对象、步骤以及应用等方面。分子克隆：其主要目的是将特定的DNA片段（如目的基因）与载体DNA（如质粒、病毒等）通过体外重组技术连接，形成重组DNA分子。这个过程旨在获得大量、稳定且可遗传的DNA拷贝
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细胞表型检测实验有哪些
细胞表型检测实验是生物学研究中非常重要的一部分，旨在通过观察和分析细胞的形态、生长、代谢、分子表达等方面的特征，来了解细胞在生理、病理或药物作用下的变化。这些实验方法各有特点和应用场景，研究者可以根据具体的研究目的和实验条件选择合适的实验方法进行检测和分析。同时，在进行细胞表型检测实
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蛋白质在细胞中的主要功能
蛋白质在细胞中的主要功能非常多样且关键，它们共同维持着细胞的正常生命活动。1. 结构组成：蛋白质是细胞膜和细胞间质的主要成分之一，参与细胞的结构构成。2. 催化作用：蛋白质可以构成人体必须催化和调节功能的各种酶。3. 免疫功能：参与机体的免疫系统，如补体、干扰素、抗体、免疫球蛋白等
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如何优化细胞悬液的均匀性？
在实际应用中，建议根据具体实验需求和样本特性，选择合适的优化策略，并进行必要的验证和优化，以确保获得均匀的细胞悬液。优化细胞悬液的均匀性是细胞生物学实验中的一个重要环节。1. 优化细胞消化和分散： ▲ 使用适当的酶（如胰蛋白酶、胶原酶等）消化细胞，确保细胞充分分散。▲ 控制消化时间和条件
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PCNA在DNA损伤修复中的角色
PCNA（增殖细胞核抗原，Proliferating Cell Nuclear Antigen）在DNA损伤修复中扮演着至关重要的角色。研究表明，PCNA的异常表达或功能缺陷与多种疾病的发生发展密切相关。例如，PCNA的泛素化修饰在跨损伤DNA合成通路中的调控作用被发现与乳腺癌的发生发展有关。此外，PCNA还参与了其他多种疾病相
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八种细胞器结构和功能
八种主要细胞器的结构和功能概述如下：1、线粒体-结构：线粒体具有双层膜结构，外膜平滑连续，内膜向内折叠形成嵴，大大增加了内膜的表面积。线粒体内部含有基质和DNA、RNA等遗传物质。功能：线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，被誉为细胞的“动力车间”。它通过氧化磷酸化过程合成ATP，为细胞提供大
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PCR实验室紫外灯，真的可以消毒吗？
紫外线根据生物效应的不同，可以分为多个波段，其中UV-C波段（200-275nm）的紫外线具有强大的消毒功能。UV-C波段中的250-270nm波段紫外线尤为强效，它能够破坏微生物细胞的DNA（脱氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）的分子结构，造成生长性细胞和（或）再生性细胞死亡，从而实现对细菌、病毒等病原体的有
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解析IVD领域七大创新技术
分子诊断技术利用分子生物学的方法，如核酸扩增、基因测序、基因芯片等，对人体的基因、RNA、蛋白质等分子进行检测，以诊断疾病或评估健康状况。其中，核酸扩增技术（如PCR）可以快速、灵敏、特异地检测出微量的核酸分子；基因测序技术（如NGS）则能确定DNA或RNA分子中碱基的排列顺序，为生物的结构、
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免疫组化样本固定与制片的实用指南
免疫组化样本固定与制片的实用指南主要涉及样本的固定、包埋、切片、脱蜡水化以及后续的处理步骤。1.在整个实验过程中，要注意操作规范和实验条件的控制，以确保实验结果的准确性和可靠性。2.样本固定、包埋、切片和脱蜡水化等步骤是免疫组化实验的基础和关键，必须严格按照实验流程进行操作。3.在实验
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细胞外基质粘弹性对细胞行为的影响
细胞外基质（ECM）的粘弹性对细胞行为具有显著影响。粘弹性是指材料在受到外力作用时，既表现出弹性（能够恢复原始形状）又表现出粘性（在变形过程中会耗散能量）的特性。在细胞培养和组织工程中，ECM的粘弹性对细胞的生长、分化、迁移、增殖等多种行为起着至关重要的作用。以下是对细胞外基质粘弹性对
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透射电镜下的细胞胞葬
透射电镜（Transmission Electron Microscope, TEM）在细胞生物学研究中是一种非常重要的工具，它利用电子束穿透样品，并通过电磁透镜放大成像，以极高的分辨率观察细胞的超微结构。关于透射电镜下的细胞胞葬（这里可能指的是细胞凋亡过程中的细胞形态变化或细胞自噬等现象，但“细胞胞葬”并非一个标
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溶酶体驱动线粒体内膜的碎片去除
溶酶体驱动线粒体内膜的碎片去除是一个重要的细胞过程，该过程对于维持线粒体健康和功能至关重要。溶酶体是细胞内的一种重要细胞器，具有消化和降解、废物溶解、免疫功能、调节细胞内pH值等多种功能。而线粒体则是细胞的“能量工厂”，负责产生ATP等能量分子，以支持细胞的正常运作。近年来，发现溶酶体与
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细胞免疫荧光实验protocol
一、试剂耗材准备：可用于荧光实验的一抗、荧光二抗、4%多聚甲醛、曲拉通（破膜剂）、BSA或二抗来源动物的血清，一般是山羊血清（用于封闭）、PBS、DAPI和抗荧光淬灭封片剂（可选用含DAPI的抗荧光淬灭封片剂）、盖玻片或专用细胞爬片、载玻片等。二、细胞爬片准备：爬片可以用一般的盖玻片，也可以用专
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细胞接毒操作步骤及注意事项
1.准备细胞：选择适当的细胞系，培养并使其达到适当的生长状态。2.准备病毒：根据你需要的病毒和浓度，制备好病毒溶液，如腺病毒、逆转录病毒等。3.接毒：当细胞长到合适密度时，就可以进行接种（建议在细胞传代48h内进行接种，细胞密度达80-90%左右进行）。移除先前的培养液，用1*PBS洗2-3次，移除残留的
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流式细胞术实验流程总览
使用蛋白质运输抑制剂来在细胞内捕获细胞因子/蛋白质。注意孵育时间以避免毒性。冻存和培养的细胞以及组织来源的细胞通常含有许多死细胞，这些细胞可能会表现出不寻常的自发荧光和非特异性染色。1）使用细胞筛网过滤可以去除细胞团块，以防止高背景染色或仪器堵塞。2）通过维持细胞在适当的温度，可以防止
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流式细胞仪类型和技术特点
通过流体学、光学和电子学三个关键系统实现细胞分析和分选。流体学系统使用鞘液输送细胞至检测点，光学系统利用激光和光电探测器捕捉细胞的光散射和荧光信号，而电子系统将这些信号转换为数字数据。多激光配置允许同时检测多个参数，而新型检测器如APD提升了检测的灵敏度。这些技术的综合应用使得流式细胞
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吐温20在WB中的作用是什么？
吐温20作为一种非离子型表面活性剂，在WB实验中主要用于洗掉非特异性结合的蛋白质，从而提高检测的特异性和信噪比。降低溶液表面张力：吐温20能够降低溶液的表面张力，使抗体更容易扩散并结合到膜上的目标蛋白。减少非特异性结合：由于吐温20的表面活性剂特性，它可以减少抗体对抗原的非特异性作用，从而
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免疫学不能不知道8个基础实验
现代分子生物学和免疫学的进展加深了我们对许多疾病的了解，并且导致了免疫新策略的产生，免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫测定。 WB 蛋白免疫印迹是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。
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细胞膜的功能结构和提取方法
细胞膜是一种特殊生物膜，不仅保证了细胞内各种生理反应有序进行，也实现了物质、能量和信号的正常传导，其大部分功能依靠细胞膜上的膜蛋白完成。膜蛋白提取的难点较多，主要原因是膜蛋白在生物体内的表达水平较低，具有极强的疏水特性，并且通常在实验条件下难以维持正确构象。生物膜的特定功能主要是由蛋白
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流式细胞——制备样本时怎样减少细胞碎片产生？
众所周知，流式细胞仪本身不能将细胞碎片自动过滤而只分析细胞,细胞碎片的产生会影响数据的质量和分析的准确性。列如，细胞碎片的存在可能会导致流式细胞仪的前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）参数的读数异常，这可能会干扰对细胞大小和颗粒度的准确评估。此外，细胞碎片还可能影响细胞活性的检测
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采血管抗凝剂的作用机制及应用
抗凝剂在医学领域中扮演着至关重要的角色，它们通过一系列精妙的作用机制，防止血液在不需要凝固的时候过早凝固，从而让我们的检验畅通无阻。采血管中常见的抗凝剂主要包括肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA）、枸橼酸钠和草酸盐等，它们各自通过不同的机制来防止血液凝固。不同的抗凝剂有不同的用处，以下是
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流式细胞术测量自然杀伤细胞毒性
使用流式细胞术测量自然杀伤细胞毒性，该方法具有不使用放射性试剂、高灵敏度和快速检测等优点，并通过对健康个体和预期NK细胞功能缺陷患者的样本进行验证，证明了其在临床环境中的有效性和适用性。NK细胞是先天免疫的重要组成部分，对免疫监视至关重要。流式细胞术提供了一种替代51Cr释放试验的方法
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如何确保实验室加热设备安全？
在发生设备故障或事故时，应立即停止使用加热设备，并采取相应的应急措施。如发生火灾，应迅速使用灭火器或灭火毯进行灭火，并及时报警。总之，确保实验室加热设备安全需要从设备选择、操作规范、维护检查和应急措施等多个方面进行综合考虑和管理。只有这样，才能有效地预防事故的发生，保障实验室人员
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Calcein-AM/PI细胞活死双染
Calcein-AM/PI细胞活死双染是一种流行的荧光染色技术，用于区分活细胞和死细胞。Calcein-AM是一种可渗透细胞膜的非荧光前体，它在活细胞中由内源性酯酶转化为绿色荧光的Calcein，表明细胞活性。丙啶碘（PI）是一种不能穿透完整细胞膜的红色荧光染料，只在死细胞中染色，因为它们的膜完整性受损
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PCR，qPCR，RT-PCR，RT-qPCR的区别
传统PCR：这是一种基本的聚合酶链反应，用于在无定量监测的情况下扩增特定DNA片段。它仅告诉我们目标DNA片段是否存在于样本中。定量PCR（qPCR）：也称为实时PCR，它不仅能够扩增DNA，还能够实时监测扩增过程，提供定量的数据输出。这是通过在PCR反应中引入荧光标记实现的，荧光强度随DNA量的增加而增
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盘点几种常见的细胞核染料
在细胞生物学研究中，细胞核染料是实验操作的核心工具之一。无论是用于观察细胞形态、研究细胞周期，还是评估细胞凋亡与坏死，细胞核染料都起着至关重要的作用。这些染料可以通过与细胞核中的DNA结合，发出荧光，帮助科研人员在显微镜下清晰地观察细胞核的形态和结构。同时，染料还可用于检测细胞状态
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CFSE细胞增殖实验
CFSE染色的基本原理是利用其荧光特性来观察和量化细胞分裂。CFSE分子可以透过活细胞的细胞膜，进入细胞后通过非特异性的酯酶活性被转化为更加亲水的形式，与细胞内蛋白共价结合。在细胞分裂时，荧光标记的CFSE将均匀分配到两个子细胞中，由于分裂的每次过程荧光信号都会减半，通过流式细胞仪可以准确测
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Co-IP结果解读及实验步骤
共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种强大的分子生物学技术，用于研究两种或多种蛋白质之间的相互作用。通过使用特定的抗体捕获目标蛋白质及其结合的蛋白质，Co-IP可以帮助科学家揭示蛋白质在细胞信号传导、疾病发展及生物体内其他关键过程中的功能和相互作用网络。这项技术不仅可以识别已
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流式实验中常见问题解答
流式细胞术，通常被称为流式实验，是现代生物医学研究中不可或缺的技术之一。这项技术通过使用激光来激发流经仪器的单细胞，并分析这些细胞散射光和荧光的特性，使研究者能够快速分析数千至数百万个单细胞的物理和化学性质。由于其能够提供细胞大小、形状及其内部和表面分子的定量信息，流式实验已成为细胞
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一文搞懂流式线粒体通透性转换孔（MPTP）实验
线粒体通透性转换孔（MPTP）是一种位于线粒体内膜上的蛋白质复合体，关键功能是调控细胞的生死。MPTP的打开会导致细胞内钙离子和其他代谢物的失衡，引发细胞凋亡。这一过程在许多生理及病理状态下极为重要，尤其是在细胞应激和损伤修复中。
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细胞换液知识点解析+小技巧
细胞换液，即更换培养细胞所用的培养基，是细胞培养中一项常规但关键的操作。其主要目的是移除代谢产物、调整营养成分和维持pH平衡，确保细胞处于最佳生长状态。定期换液可以避免营养物质耗尽和代谢废物积累，这些都可能对细胞生长产生负面影响。适当的换液频率有助于维持细胞生长环境的稳定性，支持细胞健康和增殖
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如何正确处理细胞复苏过程中的冷冻保护剂以减少对细胞的损伤？
在细胞复苏过程中，正确处理冷冻保护剂是非常关键的步骤，以确保细胞的活性和减少潜在的损伤。那么在实际操作中我们应该如何正确处理细胞复苏过程中的冷冻保护剂才能将冷冻保护剂对细胞的损伤降到最低呢？在整个复苏过程中，操作应迅速且小心，以最大程度地恢复细胞的健康状态。同时，操作人员应采取适当的防护措施，以防止冻伤或接触有害化学物质。
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细胞不贴壁，可能与这些原因有关
①胰蛋白酶消化过度：胰酶处理时间过长，可能导致细胞膜蛋白受损，影响细胞贴壁。②微生物污染：支原体感染或其他微生物污染会导致细胞功能紊乱，影响贴壁能力。③培养基pH值过碱：培养基pH值过高，可能导致细胞不适应，影响贴壁。④细胞老化：细胞传代次数过多，可能会导致细胞老化，失去贴附性。⑤接种细胞起始浓度不当
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细胞冻存时要不要缠封口膜？
1.封口膜在极低温环境下，如-80℃或液氮温度，会变得非常脆弱并容易破裂，脱落。2.封口膜在低温下可能会与冻存管内壁粘连，使得在复苏时难以完全去除。3.不缠封口膜还有助于在冻存盒中更容易地放置冻存管。4.封口膜在冻存过程中破裂，它不仅无法有效地封闭冻存管，还可能导致冻存液泄漏或液氮进入冻存
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流式细胞术中如何通过设置参数门控实现对细胞群体的筛选？
参数门设置的目的及步骤流：式细胞术中，参数门控是一种用于筛选特定细胞群体的技术。通过设置不同的参数门，可以根据细胞的物理和荧光特性来选择性地排除或保留细胞。以下是通过参数门控实现细胞群体筛选的步骤：1.前向散射（FSC）与侧向散射（SSC）门控：FSC通常与细胞大小相关，而SSC与细胞内部复杂性或颗粒度相关
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液相实验中常用溶剂间的互溶性
理解溶剂间的互溶性尤为重要，因为它直接影响到溶剂的混合效果，从而决定了溶质的溶解度、反应速率及产品的纯度。例如，在药物合成中，选择能够有效溶解所有反应物的溶剂，能够确保反应完全进行，降低副反应的发生。在生物样品的提取和分析过程中，正确的溶剂互溶性能够保证生物活性物质的完整性和稳定性
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铁死亡和细胞凋亡有什么区别
铁死亡：是一种铁离子依赖性的程序性细胞死亡形式。它主要在二价铁离子或酯氧合酶的作用下，催化细胞膜上高表达的不饱和脂肪酸，发生脂质体过氧化，从而诱导细胞死亡。此外，还表现为抗氧化体系（如谷胱甘肽GSH和谷胱甘肽过氧化物酶GPX4）的表达量降低。细胞凋亡：是一种由基因控制的细胞自主的有序的死亡
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细胞凋亡的检测方法汇总
细胞凋亡的重要性与基本概念：细胞凋亡，也被称为程序性细胞死亡，是细胞有序、主动死亡的过程，对于生物体的发育和稳态维持至关重要。这种细胞死亡方式是高度受控的，能够帮助生物体去除老旧、受损或有潜在危险的细胞，从而保持健康的细胞环境。与凋亡相对的另一种细胞死亡形式是坏死，坏死通常是因为外部
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一次把细胞培养用血清给大家聊透
在细胞培养的世界里，血清扮演着至关重要的角色。它不仅是培养基的一部分，更是细胞生长和分化的催化剂。血清中含有丰富的生长因子、激素和营养物质，这些成分能够模拟自然生长环境，促进细胞增殖和存活。血清中的生长因子，如表皮生长因子（EGF）和纤维母细胞生长因子
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荧光定量PCR全流程实验步骤和注意事项
荧光定量PCR（qPCR）技术，作为现代生物科学领域的一项核心工具，广泛应用于基因表达分析、病毒检测和癌症研究等多个领域。qPCR技术融合了传统PCR的基本原理和先进的荧光检测技术，能够精确地测定特定DNA序列的数量。它不仅提高了实验的灵敏度和准确度，还大大缩短了实验时间。在进行荧光定量PCR（qPCR）
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生物缓冲液：分子生物学中的无声英雄
在分子生物学的实验世界里，我们常关注那些显赫一时的“明星试剂”如抗体、酶和血清，这些关键试剂对实验结果具有决定性的影响。然而，在这些实验的背后，有一个经常被忽视却至关重要的幕后英雄——生物缓冲液。这种看似平凡的溶液在实验中扮演着不可替代的角色，它通过精确维护反应环境中的pH稳定，确保生物化
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何时用瓶皿培养？何时用孔板培养？
在细胞生物学研究中，细胞培养是一个关键环节，而选择合适的培养器皿更是确保实验成功的基础。无论是培养瓶、培养皿，还是多孔板，每种器皿都有其独特的用途和优势。了解何时使用哪种器皿，不仅能提高实验效率，还能确保数据的准确性和可重复性。在细胞培养实验中，选择合适的培养器皿是确保实验成功的关键
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刚复苏的细胞怎么又就挂了？
细胞复苏的关键步骤：确保活性与最小化损伤细胞复苏是生物医学实验中的一项关键技术，直接影响到细胞的活性和后续实验的有效性。正确的复苏操作不仅可以提高细胞的存活率，还可以确保细胞功能的完整性。以下是针对细胞复苏过程中几个关键操作的详细指导。复苏过程中的关键注意事项 1. 水浴时间的控制
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小白入门，如何搞懂线粒体研究
要搞懂线粒体研究，可以从以下几个方面入手，以便全面而深入地理解这一复杂而重要的细胞器。我们给大家一个大致的框架，旨在帮助初学者或感兴趣的研究者逐步深入线粒体研究的领域。一、了解线粒体的基本概念与结构 定义与功能：线粒体是真核细胞中特有的半自主性细胞器，主要负责产生细胞所需的能量
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细胞在-80℃冰箱中能保存多久
根据细胞的类型、冻存条件和冻存液的配方等因素，细胞在-80℃冰箱中的保存时间有所不同。通常情况下，细胞可以在此温度下保存几个月至一年不等。然而，对于某些特定细胞类型和使用优化冻存液的情况下，其保存时间可能会更长。总体而言，-80℃冰箱适合短期保存细胞，若需要长期保存，则建议将其转移到液氮
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线粒体的10大研究方向
1.线粒体在能量代谢中的作用：线粒体是细胞内的“动力工厂”，负责将食物转化为ATP，为细胞提供能量。研究线粒体在能量代谢中的作用，有助于理解细胞生命活动的能量需求与供应。2.线粒体与细胞凋亡的关系：线粒体在细胞凋亡过程中起着关键作用。其结构和功能的改变可以触发细胞凋亡。研究线粒体如何参与细胞
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为什么你养的细胞总是污染？细胞培养常见污染及防治！
细胞污染是指在细胞培养过程中，异种细胞、细菌、真菌、酵母、支原体等微生物或病毒等外源性物质被引入到了细胞培养物中，从而影响了细胞培养的健康和正常生长。细胞污染可能导致实验结果的失真，同时还会对细胞的生长状态、代谢活性等产生负面影响。细胞培养中的污染防治是一个系统工程，需要严格的操作规
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TRIzol提取细胞RNA
TRIzol是一种含有酚和氯仿的试剂，可以有效地分离出RNA、DNA和蛋白质。其工作原理基于物质的溶解性差异。在高盐环境中，RNA、DNA和蛋白能够在不同的有机相和水相中分层。具体来说，当样本在TRIzol中裂解后，加入氯仿并离心，系统会分成上层的水相、中间的蛋白质相和下层的有机相。RNA位于上层水相中，而D
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细胞冻存的实验步骤&注意事项
严格遵守细胞冻存实验操作规程，做好实验记录和数据归档。根据不同细胞类型选择适合的冻存液，定期更新冻存液以确保质量。细胞冻存后定期检查存活率及细胞状态，保持仪器设备的定期维护与检修。细胞冻存是细胞学研究中不可或缺的重要技术，正确的操作步骤和注意事项能有效保证细胞的长期保存与应用。
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提高悬浮细胞感染效率的关键
悬浮细胞的感染效率是在基因操作和细胞生物学实验中面临的一个重要挑战。由于悬浮细胞不依赖于基质进行生长，其独特的生物学特性使得它们在病毒感染过程中表现出较低的感染效率。提高悬浮细胞的感染效率不仅能够提升实验的成功率，还能为基因功能研究和细胞治疗提供更强有力的工具。
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细胞复苏时，到底要不要用培养基稀释含细胞的冻存液后再离心？
在细胞生物学研究中，细胞冻存和复苏是常见且重要的操作步骤。细胞冻存技术的应用不仅能够保存珍贵的细胞系，还能在需要时提供稳定的细胞来源。然而，细胞复苏过程中的操作细节，尤其是是否需要用培养基稀释含细胞的冻存液后再离心，常常引发研究者的讨论和关注。细胞冻存液通常含有高浓度的二甲基亚砜
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刚复苏的细胞为什么会背景脏还有小黑点，如何判断是细胞碎片还是污染？
细胞复苏是细胞生物学研究中的一个重要环节，但在实际操作中，常常会遇到一些困扰，比如刚复苏的细胞背景脏、出现小黑点等现象。这些问题不仅影响实验结果的准确性，还可能导致实验失败。那么，刚复苏的细胞为什么会出现背景脏和小黑点呢？这些小黑点是细胞碎片还是污染？如何判断和处理这些问题？
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细胞划痕实验步骤，干货满满
在铺细胞阶段，注意根据不同细胞类型添加适量细胞，通常约为 5x105 个细胞，以确保细胞能够在过夜培养后达到充分覆盖。在细胞划线过程中，使用枪头比着直尺，确保线条垂直于板背后的横线划痕，避免倾斜造成误差。在洗细胞和培养观察阶段，严格按照操作步骤进行，确保细胞清洁和培养条件的稳定
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细胞复苏后需要多久才能开始进行实验？怎么判断呢？
通常情况下，细胞复苏后通常需要一定的时间来恢复生长状态，以便进行后续的实验。复苏后的细胞需要在第二天（约12-24小时）观察细胞状态并更换新鲜培养基。在细胞形态、生长速度等恢复正常后，可以进行传代等操作。一般来说，根据经验复苏后的细胞需要经过2-3次传代（按照常见细胞的生长速度，2天传一代的
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细胞上清液里蛋白的浓缩操作方法
在细胞生物学和生物化学研究中，细胞上清液中的蛋白质分析是一个关键步骤。细胞上清液是细胞培养过程中从培养基中分离出的液体部分，包含了细胞分泌的各种蛋白质和代谢产物。为了进一步研究这些蛋白质的功能和特性，通常需要对其进行浓缩和纯化。本文将介绍几种常用的细胞上清液中蛋白质浓缩方法，包括超滤
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流式细胞术分析细胞周期的实验步骤
流式细胞术是一种很常见的实验方法，对于细胞周期来说，一般是采用经典的碘化丙啶（PI）染色的方法进行周期分析， PI可以和双链DNA结合产生荧光，荧光强度和DNA含量呈正比，因此，我们可以根据DNA含量的多少来进行细胞周期的分析。按照实验要求进行细胞铺板，待细胞长到需要的密度收细胞。
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线粒体，对细胞代谢的四大贡献
细胞生长与分裂：一些特殊的线粒体还能参与合成细胞生长和分裂所需的分子，如核苷酸、氨基酸和血红素等。内分泌信号分子释放：性腺和肾上腺皮质中的线粒体专门负责类固醇的生成，包括定义生物体性别的激素（雌激素、孕酮和睾酮）以及机体调节代谢和心理压力所需的糖皮质激素和矿皮质激素等。
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从分子克隆到细胞转染全解析
从分子克隆到细胞转染是一个涉及多个步骤和技术的复杂过程。分子克隆通过重组技术将目的基因与载体连接起来，形成重组质粒；而细胞转染则将重组质粒或外源基因导入真核细胞中，以实现基因的表达和功能研究。在实际操作中，需要根据实验目的和细胞类型选择合适的分子克隆和细胞转染方法，并严格按照操作步骤
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线粒体在铁死亡发生过程中的五大重要作用
1. 线粒体ROS的产生：ROS的来源：线粒体是大多数哺乳动物细胞中ROS（活性氧）的重要来源。在氧化磷酸化过程中，线粒体内部会产生大量的ROS。ROS与铁死亡的关系：ROS的增加会促进铁死亡的发生。过量的ROS会导致脂质过氧化，进而引发细胞死亡。线粒体靶向的抗氧化剂或酶可以抑制这一过程。
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手把手教学｜MTT实验检测细胞活性
MTT实验的原理依赖于细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。这种酶能催化MTT分子在细胞内的还原过程，形成水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan），并沉积在细胞中。活细胞具有此酶的功能，因此能够产生甲瓒结晶，而死细胞缺乏这种功能。二甲基亚砜（DMSO）被用来溶解细胞内的甲瓒结晶。通过酶标仪在490nm或
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如何高效复苏细胞？这四点要注意！
每次复苏细胞都手忙脚乱？好不容易复苏的细胞竟然污染了？高效复苏细胞流程包括了①从液氮罐中取出冻存细胞，放入37℃水浴锅中融化，轻柔离心后收集细胞沉淀；②缓慢用移液枪吸去上清，加入适量浓度和体积的完全培养基，重悬细胞沉淀，转移至细胞培养皿或细胞培养瓶；③根据细胞培养皿或者培养瓶的体
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如何避免细胞培养试剂交叉污染
避免细胞培养试剂交叉污染是确保实验准确性和可靠性的关键步骤。避免细胞培养试剂交叉污染需要从多个方面入手，包括规范操作流程、加强清洁与消毒、优化实验环境、提高操作人员素质以及采取其他预防措施等。这些措施的实施将有助于提高实验结果的准确性和可靠性。
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流式钙离子荧光探针实验
流式钙离子荧光探针实验是一种常用的生物化学技术，用于检测细胞内游离钙离子浓度的变化。钙离子荧光探针（如Fluo-3 AM或Fluo-4 AM）这些探针通常配制在无水DMSO中，使用前需根据实验需求稀释至适当浓度。细胞培养液、HBSS（Hank's Balanced Salt Solution）、HEPES缓冲液等。胎牛血清
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科研人必备！手把手教选抗体
在生物医学研究的世界中，抗体是不可或缺的工具。无论是用于基础科学的探索，还是应用于临床诊断和治疗策略，抗体的作用至关重要。正确的抗体可以帮助科研人员精确标记特定的细胞类型或蛋白，从而揭示生物过程的细节或疾病的本质。相反，错误选择的抗体可能导致实验结果的误导，浪费宝贵的时间和资源
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实验干货 | Edu告别细胞增殖烦恼
细胞增殖基础--细胞增殖是生物体生长和组织修复的基本过程。它涉及细胞周期的几个关键阶段：G1期（细胞生长）、S期（DNA复制）、G2期（准备分裂）和M期（细胞分裂）。每个阶段都受到精确的调控机制的控制，确保DNA复制和细胞分裂的正确进行。细胞周期的失调可能导致细胞功能异常或疾病，如癌症。
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实验干货 | 避免细胞污染的小操作
细胞培养技术是生物医学研究中的基石，它允许科研人员在控制环境下研究细胞的生长和行为。然而，细胞培养过程中的污染是常见的挑战，它可能导致实验失败或数据失真。细胞污染主要包括细菌、真菌、酵母和交叉污染。这些污染源可以通过多种途径进入培养系统，包括污染的培养基、不当操作或设备内部的污染
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双荧光素酶报告基因实验
基因报告系统的基本概念--基因报告系统是一种用于监测和量化基因表达活性的生物技术工具。报告基因，如荧光素酶或β-半乳糖酶，被插入到感兴趣的启动子下游，其表达水平直接反映了启动子的活性。这种系统在药物筛选、基因调控机制研究以及信号传导路径分析中具有重要应用
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细胞增殖检测新技术——EdU染色
在现代生物医学领域，细胞增殖的检测是研究细胞生物学基本过程的关键技术，尤其在癌症研究和药物开发中扮演着至关重要的角色。传统上，BrDU（溴脱氧尿苷）标记法广泛用于跟踪DNA复制，从而标记增殖细胞。然而，BrDU方法操作繁琐，且需要破坏细胞DNA结构才能检测，这在一定程度上限制了其应用范围
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TSA多重免疫荧光染色的实验
在TSA多重免疫荧光染色技术已广泛应用于生物学、医学研究以及临床病理诊断等多个领域。通过该技术，研究人员可以更加深入地了解组织微环境中的复杂信息，为疾病的诊断和治疗提供有力支持。1.样本准备：将组织切片进行预处理，如脱蜡、水化等。2.抗原修复：根据一抗选择合适的修复液，将切片组织浸没
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RNA提取的试剂和耗材需要哪些特点
RNA提取的试剂和耗材需要具有一系列特点以确保RNA的高质量提取。RNA提取的试剂和耗材需要具有高效裂解能力、无RNase污染、低毒性、稳定性好、兼容性强以及纯化效果好等特点。同时，耗材还需满足无RNase、耐高温高压、材质优良、密封性好、规格多样和易于操作等要求。这些特点共同保证了RNA提取过程的
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科研干货 | 一文搞懂细胞培养实验
细胞培养是生物医学研究中的一项核心技术，广泛应用于药物开发、基因研究、癌症研究等多个领域。通过体外培养细胞，科学家们能够观察和研究细胞在特定条件下的行为及反应，为理解疾病机制和开发新疗法提供了重要依据。细胞培养的基础概念细胞培养是一种在体外模拟体内环境，将细胞置于人工控制的条件下进行生长和繁殖的技术
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细胞因子检测技术概览
细胞因子检测技术是研究免疫功能和疾病机制的关键工具。ELISA（酶联免疫吸附试验）原理：利用抗体特异性结合目标蛋白，通过酶标记产生可检测的信号。应用领域：广泛用于疾病诊断、疫苗研发和免疫学研究。优点：成本低，操作简便，特异性强。缺点：灵敏度受限，批间差异可能较大。
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流式实验中的对照设置
对照在流式实验中的重要性--信号相对性：流式细胞术测量的信号（散射光信号和荧光信号）都是相对于背景的，需要对照来界定这些信号的范围，区分背景荧光和实验信号。门的位置设定：对照帮助确定选择特定细胞群体的门的位置，确保对目标细胞群体的准确分析。实验操作判断：对照有助于识别实验过程中可能
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流式细胞仪检测ROS的实验步骤
活性氧（ROS）是氧代谢的天然副产物，正常情况下，机体含量较低。当机体受到损伤刺激时，如药物毒性、缺氧等，ROS水平会急剧增加，超过机体自身清除能力时，机体氧化-抗氧化作用失去平衡，从而导致细胞膜破坏，最终引起机体细胞死亡。因此，ROS的测定有助于判断细胞损伤情况
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科研干货|CCK8细胞增殖实验
在准备阶段，您需要准备以下试剂和耗材：完全培养基、磷酸盐缓冲液（PBS）、CCK8试剂盒、96孔板和细胞计数板。此外，还需要以下仪器：培养箱、显微镜、超净工作台和酶标仪。（2）实验操作--a. 细胞种植板：首先向96孔板中加入每孔100ul的细胞悬液。通常情况下，每孔应含有1000-3000个细胞，具体的细
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教你如何将质粒转化于感受态细胞！
将质粒转化于感受态细胞是分子生物学实验中的一项基础技术，常用于将外源DNA导入细菌中以进行质粒扩增或蛋白表达。保实验所用的质粒 DNA 质量良好，浓度适中。可以通过琼脂糖凝胶电泳等方法检测质粒的纯度和完整性。准备感受态细胞。可以购买商业化的感受态细胞，也可以自己制备。感受态细胞通常需要在
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THP-1细胞的培养方法和注意事项
细胞聚团可能是细胞营养缺失或者受到损伤，所以共用了细胞膜，以便于彼此释放的促进生长的因子可以被很快接收到，细胞生长一段时间后，可吹打开，离心，然后换液。另外，THP1细胞离心速度一般不要高于800rpm，实验室常用600-700rpm，否则可能会导致细胞死亡。
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常用的DNA的提取方法
随着技术不断发展，DNA提取方法不断优化，新的技术不断出现，如纳米材料技术、芯片技术、自动化技术等在DNA效率和纯化方面都表现出明显的优势。每种方法都有优缺点，选择合适的方法需要根据实验目的、实验条件等综合考虑，不断优化条件来获取高纯度和高质量的DNA样本。
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细胞冻存管要不要缠封口膜？
细胞冻存管是否要缠封口膜并没有绝对的答案，而是需要根据实验的具体需求、冻存管的密封性能以及实验环境来综合考虑。在一般情况下，如果冻存管密封性能良好且实验环境稳定，可以不使用封口膜；但在特殊情况下，如实验对样本密封性有特别高的要求或冻存管密封性能不佳时，可以考虑使用封口膜来增强密封性
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细胞冻存管要如何正确使用和保存呢？
避免反复冻融：尽量避免对同一批细胞进行反复冻融操作，以减少对细胞的损伤和死亡。长期保存策略：对于需要长期保存的细胞样本，应制定详细的保存计划和策略，包括定期更换冻存液、更新细胞系等。综上所述，正确使用和保存细胞冻存管需要遵循一系列严格的操作规程和注意事项，以确保细胞样本的安全性和可用性。
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RNA和WB蛋白表达不一致怎么办？
当RNA表达与WB（Western Blot）蛋白表达不一致时，可能由多种因素导致。以下是一些建议的解决步骤和考虑因素：检查实验操作：确保RNA抽提和WB实验的所有步骤都严格按照标准流程进行，避免操作误差。验证实验试剂的质量和有效期，确保实验条件的一致性。重复实验：在不同时间点、使用不同的样本或批次进行重复实验，以确认结果的可靠性。
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如何提高RNA的纯度
一、实验环境和工作区域的清洁。保持清洁：RNA酶（RNase）是一种无处不在的酶，能够降解RNA。因此，保持实验台面和器具的清洁是避免RNase污染的第一步。实验人员应经常清洁实验区域，并使用RNase-free的试剂和耗材。个人卫生：实验人员应注意个人卫生，如经常更换手套、避免触摸面部等，以防止交叉污染。
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超净台和安全柜内到底能不能用酒精灯？
在超净台内，酒精灯的使用存在一定的争议。一方面，酒精灯周围可以形成一个相对无菌的环境，这对于某些需要高度无菌条件的实验步骤是有帮助的。例如，在开启试剂瓶盖、灼烧接种环或涂布棒等操作时，酒精灯可以提供一定的保护，防止灰尘和微生物的污染。此外，酒精灯的高温可以破坏细菌和其他微生物的细胞结
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细胞表型检测实验有哪些？
光学显微镜观察。使用普通光学显微镜可以直接观察细胞的大小、形状、贴壁状态等基本形态特征。例如，成纤维细胞通常呈长梭形，上皮细胞多为多边形。相差显微镜可更好地观察活细胞的细节，如细胞内的颗粒、细胞器的运动等。电子显微镜观察。扫描电子显微镜（SEM）用于观察细胞表面的微观结构，如微绒毛、褶皱等
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流式细胞术检测细胞周期的原理是什么？
流式细胞术检测细胞周期的原理主要基于细胞周期各时相中DNA含量的不同以及碘化丙锭(PI)与DNA的结合特性。流式细胞术检测细胞周期的原理是基于细胞周期各时相中DNA含量的不同以及PI与DNA的结合特性，通过流式细胞仪对细胞进行多参数、快速的定量分析来实现对细胞周期各时相的检测和区分。
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一文读懂CCK-8检测实验，看完你就会了！
在细胞生物学研究中，CCK-8 检测实验是一种广泛应用的方法，用于评估细胞增殖、细胞毒性以及药物敏感性等。下面就让我们深入了解这个强大的实验技术，看完这篇文章，你一定会掌握 CCK-8 检测实验的关键要点。CCK-8 检测实验是一种简单、快速、准确的细胞生物学实验方法。通过掌握其原理、实验步骤和注意事项
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细胞冻存时如何选择合适的冻存管？
在细胞冻存时，选择合适的冻存管可以从以下几个方面考虑：聚丙烯（PP）材质。优点：具有良好的化学稳定性，能耐受低温环境，不易破裂。对大多数细胞冻存保护剂也具有较好的耐受性，不会与保护剂发生化学反应。同时，PP 材质的冻存管透明度较高，方便观察细胞样本。适用情况：适用于常规的细胞冻存，如哺乳动物细胞、细菌、酵母等的冻存。
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冻存管选择的其他参考标准
不同颜色的冻存管可以用于区分不同类型的细胞样本或实验条件。例如，使用特定颜色的冻存管来存储特定细胞系、不同处理组的细胞或者不同冻存时间的样本。这样在存储和取用细胞时，可以快速准确地识别所需的样本，减少错误的发生。一些冻存管还带有颜色编码的盖子或标签区域，方便进行分类和标记
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关于细胞培养常见问题及解决方法的资料
在细胞培养过程中，一旦发现问题，要及时分析原因并采取相应的解决措施，同时做好记录，以便后续参考和改进。此外，严格的无菌操作、规范的实验流程和良好的实验环境对于细胞培养的成功也至关重要。如果问题持续存在或难以解决，建议咨询专业的细胞培养技术人员或相关机构。
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养死多少细胞，才能总结出这14条经验！
在生命科学和细胞培养领域，确实需要经历大量的实验、观察和失败，才能逐渐积累起宝贵的经验和知识。这14条经验（尽管未具体列出，但基于一般科研和实验经验）很可能是关于细胞培养、处理、分析等方面的深刻见解。这些经验的总结，不仅仅是关于“养死多少细胞”的数量问题，更是对实验设计、操作细节、
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DNA凝胶回收试剂盒试剂配方
DNA凝胶回收试剂盒的试剂配方因不同品牌、型号和用途而异，但通常包含一些基本的试剂和步骤。凝胶溶解液（Buffer G/PG）：用于溶解琼脂糖凝胶中的DNA。此溶液可能含有胍盐或其他离子，有助于DNA从凝胶中释放出来。洗涤液（Wash Buffer）：用于去除吸附柱上残留的杂质和盐分。洗涤液在使用前通常需要加入无水乙醇进行稀释，以达到最佳的洗涤效果
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Caspases酶活性检测
Caspases酶活性检测是细胞生物学和医学研究中的一个重要环节，主要用于评估细胞凋亡过程中Caspases家族的酶活性。Caspase酶活性检测是评估细胞凋亡过程中Caspases家族酶活性的重要手段。通过选择合适的检测方法和严格控制实验条件，可以获得准确可靠的实验结果，为细胞生物学和医学研究提供有力的支持。
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【神经免疫】| T细胞与疼痛
T细胞与疼痛之间存在密切的关系，它们通过参与神经病理性疼痛的慢性化过程、免疫调节作用以及疼痛缓解的神经免疫机制等方式，对疼痛的发生、维持和缓解产生影响。然而，由于疼痛机制的复杂性，T细胞在其中的具体作用仍需进一步深入研究。未来，随着对神经免疫机制的不断探索
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【神经免疫】| 巨噬细胞与疼痛
首先，在组织损伤或炎症状态下，巨噬细胞会被激活并聚集到损伤部位。它们会释放多种炎性介质，如前列腺素、一氧化氮、细胞因子（如白介素-1、白介素-6 等）。这些炎性物质能够降低疼痛阈值，使得神经末梢对疼痛刺激更加敏感，从而导致疼痛感觉的增强。比如说，在慢性腰痛的患者中
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RNA提取中如何避免污染
在RNA提取过程中，避免污染是至关重要的，因为RNA酶（RNase）无处不在且非常稳定，能够轻易降解RNA。保持清洁：确保实验环境和工作区域的清洁，定期消毒实验台面和器具。RNA提取必须在无RNase的环境中操作。设置专用实验室：如果条件允许，设置RNA操作专用实验室，以减少交叉污染的风险。
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双荧光素酶报告基因实验技术详解
双荧光素酶报告基因实验技术是一种分子生物学技术，它通过使用两种不同的荧光素酶——萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase, F-Luc)和海肾荧光素酶(Renilla Luciferase, R-Luc)来同时监测两个基因的活性。这项技术为基因表达调控研究提供了一种高效、可靠的方法。以下是对该技术的详细解析
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细胞增殖EdU 法原理及应用
EdU 是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖过程中被细胞摄入并整合到 DNA 中。与传统的 BrdU 检测方法相比，EdU 法具有更高的灵敏度和更快的检测速度。EdU 上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针（如 FITC Azide、AF 系列染料等）在一价铜离子的催化下，发生点击反应
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细胞培养中碰到支原体污染怎么办？
在细胞培养过程中遇到支原体污染是一个常见的问题，支原体是一种介于细菌和病毒之间的微生物，具有高度适应性和生存能力，能够在多种环境中存活并繁殖。处理支原体污染需要采取一系列措施，以确保细胞培养环境的清洁和细胞的健康生长。以下是一些具体的处理步骤和建议：
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细胞培养中的小黑点，可能是什么？
凋亡小体：细胞凋亡是程序性的细胞死亡过程，当细胞在培养环境中受到不利因素（如营养成分改变、毒素、细胞代谢产物积累等）影响时，可能发生凋亡。凋亡的细胞会形成由细胞器和细胞核碎片组成的小体，称为凋亡小体，这些凋亡小体在显微镜下可能呈现为小黑点
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细胞铺板总是铺不均匀，该如何去做
每加完半拉板子时，把细胞重新混匀，继续加样。加样结束后，可采用敲击法使细胞分布更均匀。具体操作是将板子置于台面上，左手持住板子的左边，右手轻轻敲击板子的右边缘（5-8次），然后顺时针旋转板子，依次敲击剩余三个边。注意力度适中，避免过强或过多次数的敲击导致细胞聚集
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细胞贴壁不均匀的原因
细胞贴壁不均匀的原因可以归结为多个方面，这些原因主要涉及到实验操作、设备条件以及细胞自身状态等。以下是对这些原因的详细归纳接种时没有混匀：在进行细胞接种时，如果细胞悬液没有充分混匀，就可能导致部分区域细胞密度过高，形成团块，而其他区域则细胞稀疏
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生物实验室中常用缓冲液汇总
生物实验室中常用的缓冲液种类繁多，每种缓冲液都有其特定的用途和优势。生物实验室中常用的缓冲液多种多样，每种缓冲液都有其独特的成分、用途和优点。选择合适的缓冲液对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。在实际应用中，应根据实验的具体需求和条件来选择合适的缓冲液
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神经炎症的四大分类与七大机制
急性神经炎症通常是由感染、创伤或缺血等急性损伤引起的短暂性炎症反应。这是一种机体的自我保护机制，旨在清除病原体、受损细胞和碎片，促进组织修复。在急性神经炎症中，炎症细胞迅速被募集到损伤部位，释放炎症介质，引发一系列免疫反应。
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神经系统电化学信号传导的机制与特点
神经传导发生在非常微观的尺度上，如神经元的突触间隙、离子通道等。要直接观察和测量这些微观结构中的电化学过程，需要极其先进的技术和设备。 比如，研究离子通道的开放和关闭机制，需要使用高分辨率的电生理技术，如膜片钳技术，但这种技术操作难度大，对实验条件要求高。
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线粒体凋亡信号在神经系统疾病中的五大机制
神经系统疾病是一类严重影响人类健康的疾病，其发病机制复杂多样。线粒体凋亡信号通路在神经系统疾病的发生和发展中起着重要作用。本文详细阐述了线粒体凋亡信号在神经系统疾病中的几大作用机制，包括线粒体通透性转换孔的开放、细胞色素 C 的释放、Bcl-2 家族蛋白的调控
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免疫炎症驱动神经损伤的十大作用机制
神经损伤是一类严重影响人类健康和生活质量的疾病，其发病机制复杂多样。近年来，越来越多的研究表明，免疫炎症反应在神经损伤的发生和发展中起着关键作用。免疫炎症驱动神经损伤的机制涉及多个方面，包括细胞因子的释放、氧化应激、细胞凋亡等。深入了解这些机制对于开发有效的治疗策略具有重要意义。
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测序技术在神经系统疾病诊断中的应用
神经系统疾病的准确诊断一直是医学领域的重要挑战。近年来，测序技术的快速发展为神经系统疾病的诊断带来了革命性的变化。本文详细阐述了测序技术在神经系统疾病诊断中的应用，包括其原理、优势、局限性以及在多种神经系统疾病中的具体应用案例。通过对相关研究的综述，揭示了测序技术在提高诊断准
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临床常规检测的免疫相关指标
T 淋巴细胞亚群检测：T 淋巴细胞在免疫应答中起着关键作用。通过检测不同亚群的比例，可以了解机体的细胞免疫功能状态。例如，CD4+T 细胞和 CD8+T 细胞的比例失衡可能与多种疾病相关。其机制是基于不同的表面标志物（如 CD4 和 CD8）来区分 T 淋巴细胞亚群
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氧化应激在神经损伤中的作用机制
氧化应激在神经损伤中的作用和机制一直备受关注，其通过多种途径参与神经细胞损伤过程。氧化应激是指细胞内外环境产生过多的活性氧（ROS）和活性氮（RNS）导致氧化应激反应。在正常情况下，机体通过抗氧化系统来清除ROS和RNS，维持氧化还原平衡。然而，在某些情况下，如外部损伤
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检测炎症因子水平的常见方法
检测炎症因子水平的常见方法主要有以下几种：酶联免疫吸附测定（ELISA）：这是一种常用的定量检测方法。先将特异性抗体包被在微孔板上，加入待检样本，样本中的炎症因子与抗体结合，再加入酶标记的二抗，通过显色反应，使用酶标仪测量吸光度，从而确定炎症因子的浓度。
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铁死亡在神经损伤中的作用机制
铁代谢异常：在脑缺血等情况下，脑内铁浓度可能升高。例如，缺血性脑损伤时，损伤区域附近血管渗漏可导致全铁转铁蛋白流入，使铁浓度增加；脑缺血期间脑内转铁蛋白高亲和力受体1表达上调。外源性全铁转铁蛋白增加会使血铁蛋白饱和度上升，而外源性给予去铁传递蛋白降低血铁蛋白饱和度则具有神经保护作用
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脑缺血后引发的铁死亡与其他因素引发的铁死亡有何区别？
脑缺血引发的铁死亡主要是由于脑部血液供应中断，导致氧气和营养物质缺乏，进而引起一系列代谢紊乱和细胞损伤。例如，缺血会造成细胞内铁离子的失衡和脂质过氧化的增加。其他因素如某些药物、辐射、化学物质等引发的铁死亡，可能是直接作用于特定的细胞通路或分子靶点，导致铁代谢、脂质氧化等方面的异常
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十种常用线粒体功能检测方法
线粒体是存在于细胞内的重要细胞器，它有着独特的双膜结构。线粒体就如同细胞的“动力引擎”，一方面通过一系列复杂的生化反应将有机物转化为细胞可利用的能量形式 ATP，为细胞的各项活动提供源源不断的动力；另一方面，它还参与到诸如物质代谢、细胞信号转导等多种关键过程中，对维持细胞的正常生理功
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[免疫]|常见炎症因子的分类、作用及机制
炎症因子是一类在炎症反应中发挥重要作用的生物活性分子，它们参与调节免疫细胞的活化、增殖、分化以及炎症的启动、维持和消退等过程。综上所述，这些炎症因子在炎症反应中发挥着复杂而多样的作用，它们通过相互作用和协同调节，共同维持机体的免疫平衡和炎症稳态。对这些炎症因子的深入研究有助于我们更好地理解炎症相关疾病的发病机制，并为开发新的治疗策略提供理论依据。
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液氮罐选型的几个重要问题及其解答
气相液氮罐的设计使得样本不直接接触液氮。样本被放置在托盘或冻存架上，而液氮则储存在托盘之下。样本依靠液氮蒸发上升的温度（这个温度略高于液氮本身的温度，但仍在极低的范围内）进行保存。因此，在这种方式下，样本不会直接接触液氮
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一文教你读懂Western Blot实验结果
细胞密度对转染效率有一定的影响。不同的转染试剂，要求转染时的最适细胞密度各不相同，即使同一种试剂，也会因不同的细胞类型或应用而异。转染时过高或者过低的细胞密度会导致转染效率降低，乃至表达水平偏低。最好预实验摸索下条件再进行
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WB实验总是失败？揭秘10个秘诀让你的Western blot一次成功
Western blot（WB）是一种检测特定蛋白质表达水平的实验技术，跟我们小伙伴的实验生活息息相关，但由于复杂的步骤，一不留神就做不出来，着实让人头疼。“干湿结合”比纯实验周期更短，更容易出阳性结果，以下是一些确保WB实验顺利进行的建议：
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电泳缓冲液要不要经常换？
一般来说，为了确保电泳实验的准确性和可重复性，建议定期更换电泳缓冲液。具体的更换频率可以根据实验室的实际情况进行调整。如果实验结果不稳定或出现异常，可以考虑首先检查并更换电泳缓冲液。同时，在更换缓冲液时，要确保使用新的、未开封的缓冲液，并遵循实验室的操作规程和安全注意事项。
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细胞株培养过程出现的问题及其预防和处理
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。然而，细胞株在体外培养的过程中会出现一些问题，比如：细胞株无法在培养皿上贴壁生长，细胞株生长缓慢，细胞株死亡等。解决预防处理措施参照如下：
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细胞瞬时转染效果不佳？如何让你的实验成功率翻倍？
在开始准备DNA和转染试剂稀释液时要使用无血清的培养基，因为血清会影响复合物的形成.，也不可以有抗生素，比如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些抗生素一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞。这降低了细胞的活性
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荧光定量PCR(RT-qPCR)反应体系的灵敏度提高方法
实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 是一种用于实时扩增和检测特定 DNA 或 RNA 序列的分子生物学技术。该方法利用荧光染料或探针，当与扩增的 DNA 或 RNA 分子结合时会发出信号，从而可以对目标序列进行量化。荧光定量PCR其本质是通过荧光探针或荧光DNA结合染料和实时荧光
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96孔细胞铺板的铺板密度介绍
在实验室中，细胞铺板是一项基础且重要的操作，它涉及到将单个细胞精确地铺设在培养皿中。细胞铺板密度是细胞培养实验中一个重要的参数，它直接影响到实验结果的准确性和可靠性。细胞铺板密度是指在一定体积的培养皿中铺放的细胞数量。细胞铺板密度过低可能导致细胞生长缓慢
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细胞电转效率受哪些因素影响，效率低的原因及改进建议
外加电场的强度是影响电穿孔效率的重要因素。如果电压过低，细胞的质膜改变不足以让DNA通过；反之，电压过高则会对细胞造成不可逆的损伤。研究发现，对于大多数哺乳动物细胞系，当电压在250~500V/cm范围内时，可以观察到最高的瞬时表达水平
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逆转录常见问题与解决办法
1、可以通过测逆转产物cDNA浓度判定逆转效率吗？不可以。逆转录产物cDNA是混合物，除了cDNA产物以外，还有buffer、逆转录酶、引物，同时还包含未转录的模板RNA，总RNA中的tRNA、rRNA等，都会干扰浓度测定结果，因此不能反应真实的cDNA产量。
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RNA的种类与功能介绍
人体一个细胞含RNA约10pg，而含DNA约7pg。与DNA相比，RNA种类繁多，分子量较小，含量变化大。RNA在细胞内扮演着重要的角色，可根据结构和功能的不同分为信使RNA和非编码RNA。本文将对RNA的分类、功能及其研究进展详细探讨。
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ELISA标准曲线ELISACalc绘制方法
ELISA 标准曲线可采用不同的绘图软件来绘制 ，我公司推荐使用的“ELISACalc”软件，ELISACalc软件与CurveExpert相比较，能选取的拟合模型种类较少，优点是操作简单，可以结合excel表格处理数据方便复制粘贴，计算大批量数据时有明显优势。
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细胞培养为什么要加入胎牛血清？
你是否曾经好奇过，在细胞培养过程中，为什么要加入胎牛血清？这看似简单的一步，却蕴含着生命科学的奥秘。今天，我们就来揭开这个谜底，一起探索胎牛血清在细胞培养中的神奇作用！胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
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WB蛋白样本煮多久合适？
通常来说，WB 蛋白样本的煮制时间在 3-5 分钟左右。不过，这只是一个大致的范围哦，具体时间还得根据实际情况来调整。通常6孔板细胞80%以上密度，需200ul，其他按平板面积比类推。当样品核酸、蛋白浓度过高时，煮样后会发现枪头吸不上来，非常粘、一砣一砣的，很容易堵住枪头。
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细胞培养操作时，瓶皿管盖朝上还是倒扣？
大家好！今天我们要探讨一个细胞培养中的关键问题：瓶皿管盖朝上还是倒扣？这个看似微小的细节，却牵动着细胞的命运。让我们一同深入了解吧！小伙伴说，朝上；如果放的位置在操作区，朝上有手和外面拿进去的培养基之类的从上面过的，会有污染的风险
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微生物学常用培养基配方大全
1.牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)；牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，NaC1 10 g/L，琼脂1.5~2.0 g/L，pH 7.0~7.2。121℃灭菌20 min。JSENB品牌微生物培养原料一站供应。2.高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)；可溶性淀粉20 g/L，KNO3 1 g/L，NaCl 0.5 g/L， K2HPO4 0.5 g/L，MgSO4 0.5 g/L
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ELISA样本收集处理方法
用于ELISA实验的样本一般有血清、血浆、尿液、裂解液、唾液、粪便、脑脊液、细胞培养上清以及组织匀浆等。不同样本类型的预处理方法也不同。适当的样本预处理是确保ELISA实验正确性和准确性的第一步。这里，我们将介绍几种不同样本类型的处理方法
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PCR引物设计中的关键点
引物最好在模板cDNA 的保守区内设计--DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区
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WB实验中常用的抑制剂及作用原理介绍
蛋白质纯化、提取过程中常受到其本身存在的水解酶的影响。在提取蛋白质的过程中细胞破碎释放出蛋白酶，这些酶在与欲提取的蛋白质接触时，一旦条件适宜，就会发生反应，导致蛋白质分解。因此，在蛋白质提取过程中，需要加人蛋白酶抑制剂以防止蛋白质水解以保持蛋白质的完整性
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酶标仪的工作原理以及和分光光度计的区别
由酶联免疫吸附实验法可知，酶标仪应该用比色法来分析抗原或抗体的含量，即它应依照比色原理进行工作。实际上，酶标仪就是一台变相的光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计几乎相同。图1是一种单通道、自动进样的酶标仪的工作原理图
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PCR扩增的增强剂和抑制剂有哪些？
1. 激活剂：激活剂通过改善聚合酶的活性，让整个PCR过程焕发活力。10~100ug/ml BSA（牛血清白蛋白）就能在某些情况下提升聚合酶的稳定性和活性。2. 保护剂：保护剂的作用在于防止模板DNA降解，确保DNA的完整性。如T4基因32蛋白能保护单链DNA不受核酸酶攻击。
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质粒纯化一定要注意这几点！
同一大肠杆菌母株的质粒产量可能因多种因素而有很大差异。然而，质粒的复制起点将发挥重要作用，因为它将决定每个大肠杆菌细胞的质粒拷贝数 。因此，根据质粒的拷贝数，可能需要扩大质粒制备规模或进行多次质粒制备，以获得足够的质粒DNA供下游应用使用
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培养细胞生长减慢的原因和其解决办法
可能的原因有：1.更换了不同的培养液或血清；2.培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子等耗尽或缺乏或已被破坏；3.培养物中有少量细菌或真菌污染；4.试剂保存不当；5.比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验找出可能的原因。
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血清的主要成分和功能
牛血清在细胞培养中对细胞的生长增殖具有重要甚至是难以替代的作用，它含有丰富的细胞生长必须的营养成分。主要有以下成分和功能：A、 血清中的主要物质—蛋白质如白蛋白等具有缓冲细胞培养液酸碱度、维持渗透压的作用。B、 转铁蛋白、甲状腺素结合蛋白等结合蛋白，有识别维生素、脂类、金属和其它激素等，并能与有毒金属和热原质结合，从而起到解毒作用
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细胞传代培养常见问题合集
一般拿到细胞后，应该注意什么？收到细胞先不开盖,用酒精将整个细胞瓶外壁进行消毒，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各两张）
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实验常用试剂的有效期确定及延长方法
化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关；要根据化学性质、保存条件等，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用
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蛋白质的原核表达与亲和纯化
蛋白纯化是指通过基因工程技术将编码蛋白的核酸序列导入到宿主细胞，使其大量表达，再使用适当的纯化方法将其在体外纯化出来，从而获得高纯度、活性和产量的蛋白质。蛋白质表达系统可以分为原核表达系统和真核表达系统两大类。下面介绍在原核系统中诱导表达蛋白质并使用亲和层析的方法体外纯化蛋白的原理和方法
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二氧化碳培养箱—细胞培养摇篮
一般细胞培养液的pH在7.0-7.4之间。由于碳酸盐pH缓冲系统是一种生理pH缓冲系统（它是人体血液中最重要的pH缓冲系统），所以大多数培养液用它来保持稳定的pH。用粉末配制培养液时，常常需要加入一定量的碳酸氢钠。对大多数以碳酸盐作为pH缓冲系统的培养液而言，以为了维持稳定的pH，培养箱中的二氧化碳需要维持在2-10%之间，以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度
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19个细胞免疫荧光关键点详解
免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种，是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，包括荧光抗体法和荧光抗原法，但在实际工作中荧光抗原技术应用较少。细胞免疫荧光染色是免疫荧光技术在细胞中的应用。
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细胞长不好的原因与解答！
1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；3.使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2；4.启用新的保种细胞；5.调节最佳接种细胞浓度。
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支原体检测与清除攻略
实验过程中，我们的细胞很珍贵，实验试剂也属实不便宜呢，虽说我们现在已经拥有了各种各样的支原体清除和除菌剂产品，但是避免污染的最好方式还是注意实验规范以及定期清洁，为了不给细菌、真菌、支原体卷土重来的机会，最好同时把实验环境中的污染源也一起消灭，最后希望大家的实验都顺顺利利，远离污染
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一文理清免疫荧光实验流程和常见问题
固定液种类：有机溶剂（甲醇、乙醇、丙酮等）；交联剂（4%PFA、10%中性福尔马林），固定液的选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。但针对磷酸化的抗体，不适合用甲醛，会导致磷酸蛋白从膜表面转移到胞浆中，故应选择冰冷的无水甲醇或无水乙醇，同时应注意甲醛会挥发，在4-8°C不宜储存太久
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实验中培养基和玻璃器材灭菌方法解读
干热灭菌一般是利用电热烘箱作为干热灭菌器。前面所包装好的玻璃器皿，如带棉塞的三角瓶，试管、包装好的吸管、培养皿等，放入电热烘箱中。打开烘箱顶部的通气孔，接上电源加热，使箱内空气的温度达到160℃~170℃，关闭通气孔使箱内的温度保持在160℃左右并维持1.5-2h。时间一到，切断电源
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如何优化ELISA实验？
ELISA实验优化过程中应测试许多因素，例如用于包衣的抗原或抗体的浓度、温度、各个步骤的持续时间、包被缓冲液的类型，例如磷酸盐缓冲盐水（PBS）或碳酸盐缓冲液）、样品制备方法（有或没有EDTA、去互补、血清或血浆或整个样品）。平板饱和也是一个需要优化的步骤，例如不同浓度的牛血清白蛋白（BSA）
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你想不到的PCR问题总结
变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出现假阴性;退火温度过低，可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计，检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度，这也是PCR失败的原因之一
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25种实验室常见有毒化学试剂，务必学会应对和处理！
实验室人身安全问题，永远是摆在第一位的。实验室很多试剂是有毒的，而说实话，很多实验室并没有对新人专门培训，都是师兄师姐“传帮带”。实验室有毒的化学试剂可多了，一不小心就在无形中影响了免疫系统、神经系统等，因此留意哪些是“敌人”，以及如何应对非常重要。
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实验室超纯水存放的要求
即取即用：超纯水取水后很容易遭到环境污染，所以使用前取水(即取即用)方式时最合适的。只有把超纯水与环境接触的时间缩到极短，才能够获得纯度极高的超纯水。 存放时间：在配置高纯度的化学试剂时，尽量不要使用长时间储桶中存放的超纯水，因为储桶经长时间使用后，会因杂质、微生物的污染而造成水质的劣化，超纯水像这种水，在使用时已经不再是超纯水。
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荧光定量PCR实验中对照类型介绍
qPCR从样本采集到结果检出有很多的步骤，包括样本采集、样本保存、样本处理、样本检测、数据分析等一系列环节，不同的环节可以选择不同的对照进行监测，对照总体可分为阴性对照与阳性对照两类
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一文带你了解11项细胞因子
细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，形成了十分复杂的细胞因子调节网络，参与人体多种重要的生理功能
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细胞培养基常见问题注意这些就够了！
细胞培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分，但是最基础的培养基却给很多实验者带来了一系列的问题。如果细胞状态不好，后续试验将无法进行，甚至前功尽弃。如何选用培养基? 选择培养基没有一定标准，有几点建议可供参考：1. 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基
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质粒菌株产品操作说明书
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养）①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
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如何判断并预防黑胶虫污染
目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了极大的影响。“黑胶虫”至今无明确定义，其是生物还是非生物？是细菌还是真菌？还是血清中的蛋白结晶？各有说法，且不同人员观察到的形态不一。通过检测发现
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ELISA试剂盒的测试要求
固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良
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总结ELISA加样方法技巧
在ELISA中除了包被外，一般需进行4-5次加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样一滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底
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血清说明书——储存、解冻、使用方法
血清在生产制备完成后，通过质量检测，然后被运送至市场上销售。整个过程中，包括运输流程，储存温度应严格保证在-20℃，避免反复冻融影响血清活性。实验人员在收到血清，检查完好后，及时将血清送至-20℃冰箱中储存，用时再取出采用三步法解冻
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培养细胞生长减慢的原因和其解决办法
1.更换了不同的培养液或血清；2.培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子等耗尽或缺乏或已被破坏；3.培养物中有少量细菌或真菌污染；4.试剂保存不当；5.比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清支持细胞生长实验找出可能的原因。
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如何避免细胞污染和细胞发生污染处理方法
如何避免细胞污染，细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
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培养细胞出现死亡其可能的原因和解决办法
可能的原因:有培养箱内无CO2；培养箱内温度波动太大；细胞冻存或复苏过程中损伤；培养液渗透压不正确；培养液种有毒代谢产物堆积等。解决办法:可以检测培养箱内CO2浓度，检查培养箱内温度；取新的保存细胞种；检测培养液渗透压等；换入新鲜培养液等。
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放置在冰箱中的培养基颜色会发生变化，为什么？
培养基保存于4℃冰箱中，培养基内CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中酸碱指示剂（通常为 phenolred）的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱后再用于细胞培养将造成细胞生长停滞或死亡。培养基偏碱时，可以通入无菌过滤的CO2，以调整pH值。
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培养细胞时应使用5%还是10%CO2,培养液pH对细胞生长的影响
一般培养基中大都使用HCO3-/CO3-2/H +作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。
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如何消除组织培养的污染
首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉
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6孔细胞培养板接种和换液
问：我的细胞传代很正常，但一种到六孔板里（不管加药和对照），总有两三个孔（随机）细胞长得不好，很小，像破碎了。有人遇到过这种情况吗？到底是啥原因呢？请各位指点。答：可能跟你加液的温度有关。如果你细胞刚刚拿出来换液加液，培养基也是从4度冰箱拿出来不久，很容易细胞就会冻死了
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细胞复苏的操作步骤及注意事项
平时研究用的细胞，有需要冷冻保存。冷冻的过程称为冻存，把冻上的细胞化开的过程叫细胞复苏。细胞复苏是一简单的试验操作，但操作中有许多需要注意的事项，在实验操作中注意细小问题，才能使复苏后的细胞状态保持良好。
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关于IgG的作用，及与IgM的区别
IgG全称Immunoglobulin G，又称免疫球蛋白G。是血清主要的抗体成分，约占血清Ig的75%。其中40～50%分布于血清中。IgG主要由脾、淋巴结中的浆细胞合成和分泌，以单体形式存在。人IgG有四个亚型：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。
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常用细胞固定液及优缺点比较
将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮（放心，丙酮在此温度不会为固体的）细胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。
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HE染色法的原理及步骤
HE 染色法为苏木精-伊红染色法，是石蜡切片技术里常用的染色法之一，也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法。属性为碱性的苏木素染色液可以使细胞着蓝色，为酸性的伊红使细胞着红色，其结果胞核呈蓝色，胞浆呈红色。
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Hank's与D-Hank's的作用
Hank's液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液（Balanced Salt Solution,BSS ）， 主要用于配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞组织培养液。Hank's也称作HBSS，英文全名Hank's Balanced SaltSolution。
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western blot实验注意事项
Western Blot实验又称蛋白质印迹法、免疫印迹试验。Western Blot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。Western Blot原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。
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Masson 三色染色试剂盒染色原理方法
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
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TAE缓冲液与TBE缓冲液的作用区别
分子生物学实验中常用的电泳缓冲液主要有三种：TAE、TBE和TPE。TBE与TPE缓冲容量高，DNA分离效果好，但TPE会导致DNA片段回收时含磷酸盐浓度高，容易使DNA沉淀。TAE缓冲容量低，但价格较便宜，TBE缓冲液含有的EDTA可螯合二价阳离子，可抑制DNase活性，防止PCR扩增产物降解。
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链脲佐菌素如何诱导糖尿病动物模型
链脲佐菌素（STZ）是一种氨基葡萄糖-亚硝基脲，是一种DNA烷基化试剂，能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白（GLUT2 glucose trasport protein）独自进入细胞。对胰腺胰岛素诱发的β-细胞具毒性。
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BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白浓度的原理及特点
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知，二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子（biuret reaction），一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。
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抗荧光衰减封片剂（含DAPI）和不含DAPI的区别
抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光衰减的封片试剂。以甘油为基础，加入抗荧光衰减剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后，样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。在封片时用移液枪滴一滴抗荧光衰减封片液，盖上盖玻片就可以了。
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细胞冻存液的原理及配制方法
细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
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教你成为平淡无奇的WB实验小能手—样本制备篇
蛋白质印迹（Western Blot, WB）又称为免疫印迹（Immunoblot），是利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）将样品中分子量大小不同的蛋白分开，然后通过电转移的方法将凝胶中的蛋白定量地迁移并几乎原位复制、固定到固相膜上，再利用抗原、抗体的特异性结合反应，特殊的抗体标记技术以及相应的检测方法，进而对目的蛋白进行定性、相对定量检测的技术。
