在RNA提取过程中，避免污染是至关重要的，因为RNA酶（RNase）无处不在且非常稳定，能够轻易降解RNA。以下是一些关键措施来避免RNA提取中的污染：
一、控制实验环境
保持清洁：确保实验环境和工作区域的清洁，定期消毒实验台面和器具。RNA提取必须在无RNase的环境中操作。
设置专用实验室：如果条件允许，设置RNA操作专用实验室，以减少交叉污染的风险。
二、个人防护
穿戴防护装备：操作人员应严格戴好口罩、帽子和手套，实验过程中手套要勤换，避免触摸面部等，以防止交叉污染。
注意个人卫生：保持个人清洁，避免将外源性RNase带入实验区域。
三、使用无RNase的器具和试剂
玻璃器皿处理：所有的玻璃器皿（如试管、烧杯等）均应在使用前于180℃的高温下干烤6小时或更长时间，以去除RNase。
塑料器皿处理：塑料器皿（如移液器枪头、EP管等）应使用无RNA酶专用产品，或使用0.1% DEPC水浸泡处理。注意，有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用氯仿冲洗。
电泳槽处理：有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3% H2O2室温10分钟，然后用0.1% DEPC水冲洗，晾干。
溶液配制：配制的溶液应尽可能用0.1% DEPC处理，并在37℃处理12小时以上。之后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经0.22μm滤膜过滤除菌。
四、操作细节
样品处理：样品采集后应迅速液氮冷冻，并于-80℃冰箱保存，以减少RNA降解的风险。
裂解充分：裂解液的用量需要精确控制，以确保组织或细胞能够完全裂解，从而释放出RNA。裂解过程中的温度和时间也需要严格控制，以避免RNA的降解。
分层操作：在提取过程中，如使用氯仿等试剂进行分层时，应仔细操作以避免接触到中间层，因为中间层含有杂质和DNA，会影响RNA的纯度。
洗涤和干燥：使用75%乙醇进行洗涤可以有效地去除多余的盐和有机溶剂，提高RNA的纯度。干燥时间也需要控制得当，以避免RNA沉淀中残留有毒有机溶剂或RNA难以溶解。
五、使用抑制剂
焦磷酸二乙酯（DEPC）：DEPC是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂，它通过和RNA酶的活性基团结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。但需要注意的是，DEPC处理后的溶液需要高压灭菌以去除残留的DEPC。
其他抑制剂：如异硫氰酸胍、氧钒核糖核苷复合物、RNA酶的蛋白抑制剂（RNasin）等，这些抑制剂可以在不同程度上抑制RNA酶的活性，提高RNA提取的成功率。
综上所述，避免RNA提取中的污染需要从多个方面入手，包括控制实验环境、个人防护、使用无RNase的器具和试剂、注意操作细节以及使用抑制剂等。这些措施的实施将有助于提高RNA提取的纯度和成功率。
