在细胞培养过程中遇到支原体污染是一个常见的问题，支原体是一种介于细菌和病毒之间的微生物，具有高度适应性和生存能力，能够在多种环境中存活并繁殖。处理支原体污染需要采取一系列措施，以确保细胞培养环境的清洁和细胞的健康生长。以下是一些具体的处理步骤和建议：
一、确认污染
首先，需要通过显微镜观察、基因检测（如PCR）等方法确认细胞是否已被支原体污染，并确定污染的严重程度和范围。
二、处理污染
根据污染的具体情况，可以选择以下不同的处理方法：
终止试验，丢弃污染细胞
如果污染严重，且细胞并非特别珍贵或不可替代，可以选择终止试验，丢弃所有被污染的细胞和耗材。随后重新复苏细胞，注意选用未被污染的细胞株、血清和培养基，并规范操作。
使用支原体杀除剂
对于珍贵的、样品不可再得的细胞，或价格昂贵的种子细胞，无法直接丢弃。
使用支原体抑制剂
对于已耗费大量时间和资源扩增的细胞，或经过特殊处理（如基因转染、体外刺激）的细胞，可以选择使用支原体抑制剂。
三、预防措施
除了处理已发生的支原体污染外，还需要采取一系列预防措施，以减少未来污染的风险：
加强实验室清洁和消毒
定期清洁实验室环境、实验器材以及培养箱等设备，减少支原体污染的风险。每次实验操作完成后，都要及时清理实验台面，确保没有残留物或废弃物。实验结束后，应进行彻底的清洁和消毒。
使用合格的器皿和耗材
选择高质量的器皿和耗材，避免使用有破损或污染的器皿。如果条件允许，可以购买专门的细胞培养器皿和耗材。
防止空气污染
在进行细胞培养时，要确保空气洁净度。尽量减少不必要的进出实验室，避免引入外来微生物。可以使用空气过滤器和生物安全柜来提高空气质量。
严格控制实验室人员的卫生
实验室人员应该保持良好的个人卫生，避免将外来的微生物带入实验室。实验前要洗手、消毒，穿戴适当的防护服。
定期检测微生物污染风险
定期对实验室环境和设备进行检测，以确保没有微生物滋生。如果有任何异常，应及时采取措施，防止微生物污染细胞系。
建立洁净室
洁净室通过空气过滤、表面消毒等措施，减少环境中支原体的数量，从而避免细胞培养过程中支原体的污染。洁净室不仅需要具备全面的空气过滤系统，而且还需要定期进行环境检测和表面消毒，以确保其符合洁净标准。
综上所述，处理细胞培养中的支原体污染需要采取综合措施，包括确认污染、选择适当的处理方法和加强预防措施。只有这样，才能有效地减少支原体污染对细胞培养的影响，确保实验结果的准确性和可靠性。
