实验样本的保存是确保实验结果准确性和可靠性的重要环节。以下是一些常规实验样本保存的方法及注意事项：

 

一、样本保存的七要素

一致：实验组与对照组取样需保持一致，如组织样本的大小、取样部位，血液样本的性别、年龄匹配，尿液样本的取样时间等。

除杂：去除与实验无关的杂质，如动物组织去血、植物组织去除泥土等污染物，菌体及细胞去除培养基等。推荐使用PBS缓冲液或生理盐水进行清洗，并用吸水纸吸干残留液体。

低温：样本预处理应尽量在低温条件下进行，可以在冰上进行杂质去除和分装的操作，并低温保存，通常保存在-80℃冰箱中。

分装：根据实验用量进行分装，避免反复冻融，以减少对样本的损害。

迅速：样本的收集、制备、存储和运输应尽可能迅速，以压缩样本采集到正式实验的时间。

包装：建议使用优质的离心管、冻存管等容器收集样本，以防在运输和操作过程中样本管破裂以及聚合物对样本造成污染。对于植物样本，可以用锡箔纸包装，并套一个自封袋以防止运输过程中样本洒落。

运输：根据样本的特性选择合适的运输条件，如干冰运输或冰袋运输等。

 

二、不同类型样本的保存方法

组织样本

取新鲜组织，用无尘纸快速吸去血液。

将组织剪成小块，放入装有液氮的锡箔纸中速冻。

速冻后，将组织块放入液氮预冷的离心管中，液氮速冻5分钟后，-80℃保存。

 

细胞样本

收集细胞悬浮液于1.5ml的离心管中，离心去上清。

使用PBS洗涤三次，液氮速冻5分钟后，-80℃保存。

 

血清样本

收集全血，室温放置2小时。

4℃下3000rpm/min离心10分钟，吸取上部的血清。

将血清分装后，-80℃保存。

 

分子实验样本（RNA/DNA）

RNA提取：组织取材需在组织离体30分钟内完成，将组织切成薄片并完全浸没于TRIzol溶液中。液氮速冻后，-80℃保存。如不能立即提取，可储存在RNAlocker中，在室温下可稳定保存1周，4℃下可稳定保存1个月，或永久保存在-20℃。

DNA提取：组织或细胞样本取材后，PBS清洗2-3次，液氮速冻后，-80℃保存。

 

血液样本

加入适量的TRIzol和新鲜血液（比例通常为3:1-5:1），用移液器吹打混匀。

剧烈震荡混匀1-2分钟，室温孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。

编号并封口膜封存后，-80℃冻存。注意避免反复冻融。

 

液氮保存：
这是保存一些对温度极其敏感或需要长期高质量保存的样本的理想方法，如干细胞、胚胎等。

比如在干细胞研究中，为了最大程度地保持干细胞的特性和功能，通常采用液氮保存。

 

添加保护剂：
对于某些样本，如细胞，在冷冻保存时需要添加保护剂，如 DMSO（二甲基亚砜），以减少冰晶形成对细胞的损伤。

 

干燥保存：

真空干燥：适用于保存一些容易吸湿的样本，如某些药品粉末。

冷冻干燥：常用于保存生物活性物质，如蛋白质、酶等，能在干燥状态下保持其活性。

 

三、长期保存样本的注意事项

对于无法立即进行实验的样本，应选择适当的保存条件进行长期保存。

不同的储存温度对样本的稳定性有不同影响。通常，-80℃是较常用的样本保存温度，适用于大多数生物大分子、细胞和组织的保存。但对于RNA等易降解的物质，建议使用更低的温度如-196℃（液氮液相）进行保存。

在长期保存过程中，应定期检查样本的状态，确保样本的完整性和稳定性。

 

总之，实验样本的保存需要综合考虑多个因素，包括样本类型、保存条件、运输方式等。只有采取正确的保存方法，才能确保实验结果的准确性和可靠性。