一、实验原理
（1）CCK-8溶液可直接加入细胞样品中，无需进行各种成分的预配。
（2）CCK-8溶液中含有WST-8。
（3）当WST-8在存在电子耦合试剂的情况下与细胞线粒体内的部分脱氢酶发生还原反应时，则会形成橙黄色的formazan颗粒。
（4）随着细胞增殖速度的加快，形成的颜色会变得更加深沉。
（5） 细胞毒性增大会导致颜色较浅的形成。
（6）相同细胞数量情况下，formazan的生成量与细胞数目呈线性关系，颜色深浅与细胞数量呈正相关。
二、实验步骤
（1）实验准备 在准备阶段，您需要准备以下试剂和耗材：完全培养基、磷酸盐缓冲液（PBS）、CCK8试剂盒、96孔板和细胞计数板。此外，还需要以下仪器：培养箱、显微镜、超净工作台和酶标仪。
（2）实验操作
a. 细胞种植板：首先向96孔板中加入每孔100ul的细胞悬液。通常情况下，每孔应含有1000-3000个细胞，具体的细胞数量会根据细胞的大小和增殖速度而定。每个实验组需设置3-5个复合孔，同时在周围环绕一圈PBS，以减少蒸发带来的影响。细胞悬液充分混匀，避免细胞沉淀
b.孵育：培养箱37度 5%CO2预培养24h
c.加药：贴壁后吸出培养基，实验组中加入含药培养基，空白组加入不含药培养基
d.孵育：培养箱37度 5%CO2培养
e.CCK8处理：每孔加10ulCCK8试剂（或CCK8:培养基=1：10）不要有气泡，会影响OD值。
f.孵育：培养箱孵育1-4h孵育时间越长，OD值越大；各时间段细胞活力孵育的时间要保持一致！
g.吸光度测量：用酶标仪测定在450nm处的吸光度（间接反映活细胞数量）。
暂时不测的话要终止反应，将板子置于4度冰箱内，24h内检测如果要测具体细胞数，可以做标准曲线测定OD值在1-2之间可用。
三、数据处理
（1）计算细胞存活率的公式如下：细胞存活率 = （实验孔的OD值 - 空白孔的OD值） / （对照孔的OD值 - 空白孔的OD值） * 100%
（2）计算细胞抑制率的公式如下：细胞抑制率 = （空白孔的OD值 - 实验孔的OD值） / （空白孔的OD值 - 对照孔的OD值） * 100%
四、常见问题及解决方案
（1）若待测孔中存在气泡，可通过将针尖加热并扎破气泡解决此问题。
（2）若待测孔含有氧化还原物质或被添加了影响显色反应的物质，可进行以下步骤解决：先将细胞贴壁，随后弃掉培养基，用PBS洗涤两次，最后加入新的培养基。
