提取方法
物理法
物理法提取DNA主要是通过离心、研磨、超声波处理、冻融等物理方式破坏细胞壁和细胞膜，使细胞内的DNA释放出来。
● 离心：一般对于悬浮生长的细胞，可通过离心的方式来提取DNA。
● 研磨：对于一些组织样本，可通过使用匀浆器、研磨棒等手段破碎细胞，获得细胞内物质。
● 超声波处理：利用超声波的能量来破坏细胞膜和细胞壁，从而释放DNA。
● 冻融：通过反复冷冻和融化样本，使细胞内外形成冰晶并破裂细胞壁，从而释放DNA。
优点：
① 操作简单，不需要复杂的设备和试剂。
② 适用于各种样本，尤其对试剂敏感的试剂。
③ 不容易改变样本的原有性质。
缺点：
① 易引入外界污染，造成DNA纯度较低，需要进一步纯化处理。
② 操作较剧烈，容易对DNA造成损伤。
③ 对于某些含糖、脂类的样本，物理提取效果可能不佳。
化学法
化学法提取DNA是一种常见的DNA提取方法，通过特定的化学试剂和步骤，从样本中破碎细胞、去除蛋白质、分离和纯化DNA。该法操作较物理法复杂，但是可得到纯度较高的DNA。
● 酚-氯仿法
是提取DNA比较传统的方法，主要步骤包括：细胞裂解、DNA和酚-氯仿混合、混合离心、移除水相、异丙醇沉淀、乙醇洗涤、干燥溶解等步骤。
优点：
① 成本低廉：所用试剂基本上为实验室常见的，如氯仿，苯酚，价格较低。
② 纯度高、效果好、保持天然状态，可长期保存，可用于构建DNA文库。
③ 实验条件要求低，不需要特殊的设备，适用于多种实验条件。
缺点：
① 操作繁琐，需要多次离心和转移液体，容易造成交叉污染。
② 毒性较大：酚-氯仿是有毒物质，长期操作可能对实验人员有危害。
③ 提取时间长，不适合微量操作。
● 盐溶解法
是一种简单和经济的DNA提取法，基于DNA在不同浓度的盐溶液中有不同溶解度的原理来提取DNA的方法。主要包括细胞裂解、加入盐溶液、离心沉淀DNA、洗脱纯化DNA、洗涤干燥、溶解保存等步骤。
优点：
① 操作简单：只需要少量的试剂和基本的设备。
② 节约时间：一般只需要30min左右即可完成，适合快速提取DNA样本。
③ 适合小规模的实验室。
缺点：
① 提取的DNA质量和纯度不高，对于一些需要高灵敏度和高纯度实验有一定的影响。
② 不适用于样本量大的样品，提取的时间更长。
③ 需要进一步的纯化处理来提高DNA的质量。
● 异硫氰酸胍法
提取DNA主要是利用异硫氰酸胍的化学性质有效的提取DNA，主要包括细胞裂解、加入硫氰酸胍硫、去除杂质、沉淀DNA、洗涤干燥、溶解保存等步骤。
优点：
① 高效率：异硫氰酸胍可快速溶解DNA，提高效率。
② 高纯度：通过合适的纯化步骤，可得到纯度较高的DNA。
③ 应用范围广：适合多种类型的生物样本，如组织、血液、细胞等。
缺点：
① 成本高：异硫氰酸胍作为一种特殊的试剂，成本较高。
② 毒性大：异硫氰酸胍是一种化学试剂，长期接触可能危害人的身体健康。
③ 操作较为繁琐：提取步骤多，相对于简单的提取方法，操作较复杂。
● 试剂盒提取DNA法
试剂盒简化了DNA提取的步骤，通过预先制备的试剂和操作步骤，可快速、高效的提取DNA。
● 磁珠法
提取DNA主要基于磁珠表面特殊的官能团和DNA分子的亲和力，这些官能团可选择性的与DNA分子结合，形成DNA-磁珠复合物，在磁场的作用下，复合物能够迅速从溶液中分离出来，实现DNA的快速提取和纯化。
优点：
① 高效率：提取过程简单快速，不需要复杂过程。
② 高纯度：可出去大多数非特异性结合物质，获得纯度较高的DNA。
③ 适用范围广：适合大多数的样本，如细胞、组织等。
缺点：
① 成本高：相对于物理和化学法，磁珠法提取试剂盒价格较高。
② 样本类型和质量依赖性高：不同来源、不同类型或不同质量的样本需要采用不同的磁珠，否则会影响提取效果。
③ 需要特定的设备和操作技能：如磁力架等，如果设备或操作技能不足，都会影响DNA的提取效果。
● 硅胶柱法
是一种快速高效提取DNA的方法，使用硅胶膜作为DNA的吸附载体。主要包括裂解细胞组织、DNA吸附、洗涤、洗脱纯化DNA。
优点：
① 操作简单：硅胶柱法不需要复杂的设备和技术，可快速完成DNA的提取。
② 高纯度：有效去除样本中的杂质，获得高浓度的DNA。
③ 高回收率：硅胶膜可高效吸附DNA分子，同时不阻塞空隙，可获得高的DNA回收率。
缺点：
① 成本较高：相比较其他DNA提取方法，需要硅胶柱等专用器材，成本高。
② 不适用于大量样本：大量样本需要更多的硅胶柱和试剂，时间成本都会增加。
③ 有交叉污染风险：操作过程中如果不遵守规则，可能会造成样本间交叉污染。
总结
随着技术不断发展，DNA提取方法不断优化，新的技术不断出现，如纳米材料技术、芯片技术、自动化技术等在DNA效率和纯化方面都表现出明显的优势。每种方法都有优缺点，选择合适的方法需要根据实验目的、实验条件等综合考虑，不断优化条件来获取高纯度和高质量的DNA样本。
