多轮流式细胞术，即流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）在多个参数和轮次上的应用，是一种高效的单细胞分析/分选技术。它能够对大量的细胞或非细胞的颗粒进行快速、准确、多参数的高通量检测分析。以下是对多轮流式细胞术的详细解析：
一、基本原理
流式细胞术的基本原理是使用荧光探针标记待检测的生物样本，通过流式细胞仪检测生物样品上的被标记的荧光信号来获取相应的生物学信息。其两大核心要素是样品的荧光标记技术和流式细胞仪。
荧光标记技术：利用荧光素分子与特定的化学物质或抗体结合，对目标细胞或分子进行标记。荧光素分子在吸收激发光后发出荧光信号，这些信号被流式细胞仪接收并转化为可分析的数据。
流式细胞仪：主要由流动室与液流驱动系统、激光光源及光束成形系统、光学系统、信号检测与分析系统等部分组成。通过高压驱动的液流使细胞或颗粒通过激光束，产生的散射光和荧光信号被接收器接收并转化为电信号，进而进行数据处理和分析。
二、多参数分析
多轮流式细胞术能够同时检测多个参数，这是其显著优势之一。通过不同的荧光素标记不同的目标分子，可以在一次实验中同时检测细胞的多个生物学特性，如细胞表面抗原、细胞内蛋白质、DNA含量、细胞周期等。这种多参数分析能力使得流式细胞术在复杂生物系统的研究中具有极高的应用价值。
三、应用领域
流式细胞术已被广泛应用于细胞生物学、分子生物学、免疫学、血液学、肿瘤学、遗传学、药学、植物学、海洋生物学、临床医学等众多领域。以下是一些具体的应用实例：
免疫学：用于淋巴细胞亚群分析及绝对计数，如T细胞、B细胞、NK细胞等的检测。在移植过程中，流式细胞术可用于计数CD34+造血干细胞数量，对确定采集造血干细胞的时机、判断供体细胞的植入水平、随访免疫重建状态等至关重要。
肿瘤学：在肿瘤的诊断和分型中，流式细胞术可用于检测肿瘤细胞的特异性抗原表达、DNA含量异常等。此外，流式细胞术还可用于监测肿瘤治疗后的微小残留病灶（MRD），为肿瘤复发提供早期预警。
血液学：在血液系统疾病的诊断中，流式细胞术可用于鉴别不同类型的白血病、淋巴瘤等。通过检测细胞表面抗原和细胞内蛋白质的表达情况，流式细胞术能够为血液系统疾病的精准治疗提供重要依据。
药物研发：流式细胞术在药物研发中也发挥着重要作用。它可用于早期靶点机制验证、抗体发现和表征、临床前药理药效评价、临床biomarker研究等环节。通过检测药物对细胞生物学特性的影响，流式细胞术能够为药物的研发和优化提供有力支持。
四、技术进展
随着科技的不断发展，流式细胞术也在不断进步和完善。近年来，全光谱流式细胞仪等新型仪器的出现，使得流式细胞术在检测灵敏度和分辨率方面得到了显著提升。同时，多种新型荧光素和标记技术的开发也为流式细胞术的应用提供了更多可能性。
综上所述，多轮流式细胞术作为一种高效、多参数的单细胞分析/分选技术，在生物医学研究中具有广泛的应用前景和重要的科学价值。随着技术的不断进步和完善，相信流式细胞术将在更多领域发挥更大的作用。
