2024/9/17 12:40:00

我们知道通常在细胞复苏后需要进行换液传代,等待细胞状态稳定之后才进行实验,那具体是多久呢?又该怎么判断呢?

 

通常情况下,细胞复苏后通常需要一定的时间来恢复生长状态,以便进行后续的实验。复苏后的细胞需要在第二天(约12-24小时)观察细胞状态并更换新鲜培养基。在细胞形态、生长速度等恢复正常后,可以进行传代等操作。一般来说,根据经验复苏后的细胞需要经过2-3次传代(按照常见细胞的生长速度,2天传一代的话,也就是一周的时间)细胞活力恢复后才能进行后续的实验。对于某些细胞,复苏后状态很好的情况下,可以提前开始实验。

 

关于传代的时间,不同的细胞有所差别,大家根据自己养的细胞的特性并观察即可,一般我们会在细胞密度达到80%左右进行传代。至于一传几能长得又好又快建议参考细胞说明进行。一般刚开始传代就按1传2。

 

为了判断复苏后的细胞是否适合进行实验,可以采取以下几种方法:

1、观察细胞形态:在显微镜下观察细胞的形态和外观,如果细胞形态正常,大小一致,没有明显的损伤或死亡,则说明细胞复苏情况较好。 

2、细胞计数:使用血球计数板或自动细胞计数仪对细胞悬液中的细胞数量进行计数,以评估细胞的密度和活力。 

3、细胞生长曲线:将细胞接种到培养板上,定期测量细胞的数量,并绘制细胞生长曲线。如果细胞生长正常,则说明复苏后的细胞健康状况良好。 

4、细胞功能检测:根据细胞的类型和应用,可以选择适当的细胞功能检测方法,如细胞增殖试验、细胞分化试验、细胞吞噬试验等,以确保细胞功能正常。 

5、染色排除法:使用台盼蓝等染料进行染色,活细胞不被染色,死细胞则被染色,以此区分活细胞与死细胞。 

6、MTT法:通过测定细胞代谢活性来评估细胞的活力,这是一种常用的细胞增殖和毒性检测方法。

 

根据细胞形态观察,细胞繁殖速度等,按经验传2-3代后开始实验,不会再单独进行其他辅助判断的实验。因为每个人养的细胞和实验室环境不同,所以在实际操作中,根据实际情况来决定什么时候开始实验即可

 

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