2024/9/18 11:08:00

细胞污染是指在细胞培养过程中,异种细胞、细菌、真菌、酵母、支原体等微生物或病毒等外源性物质被引入到了细胞培养物中,从而影响了细胞培养的健康和正常生长。细胞污染可能导致实验结果的失真,同时还会对细胞的生长状态、代谢活性等产生负面影响。

 

细胞培养中常见的几种污染

在细胞培养实验中,常见的几种污染主要包括细菌污染、真菌/酵母污染、支原体/病毒污染和交叉污染等。

细菌污染:
细菌是细胞培养中最常见的污染之一。细菌的存在会导致培养物变浑浊、产生异味等现象。细菌污染通常由于操作不当、器具或培养基不洁净等原因引起。有效的控制措施包括实验前消毒实验室设备和工作台、采用无菌操作技术、添加适量抗生素等。

 

真菌/酵母污染:
 真菌和酵母是细胞培养中另一类常见的污染源。它们会在培养皿或培养瓶中形成棉状块或丝状物,严重影响细胞生长。预防真菌/酵母污染的方法包括严格控制培养室湿度、定期清洁消毒培养器具、避免长时间暴露培养物于空气中等。

 

支原体/病毒污染:
支原体和病毒是细胞培养中比较严重的污染源,因为它们可引起细胞变性、死亡或传播疾病。预防支原体/病毒污染的关键在于严格遵守生物安全操作规程,如确保使用无害的培养物品、正确处置感染性废弃物等。

 

交叉污染:
交叉污染是指从一个培养物传播到另一个培养物的现象,常见于细胞培养物品、器具或操作过程中。为避免交叉污染,可以定期清洁和消毒工作台、培养箱等设备,避免混合使用实验器具。总的来说,细胞培养中的常见污染种类繁多,控制污染源、加强无菌操作、定期消毒和检测培养物的纯度等措施是预防污染的关键。及时发现并处理污染现象,对于确保细胞培养实验的准确性和可靠性至关重要。

 

细胞培养中的污染防治
细胞培养过程中,污染问题不仅会影响实验结果的准确性,还可能导致整个实验失败。了解和预防细胞培养中的污染,是确保实验成功的关键。以下是细胞培养中常见的污染类型及其防治措施。

 

一、细菌污染

来源:操作人员的手、衣物和呼吸。使用的培养基、血清和水源。

防治措施:
严格无菌操作: 在细胞培养过程中,操作人员应佩戴口罩、手套,使用经过高温灭菌的器具。
使用无菌试剂: 选择经过无菌处理的培养基、血清和水源。
定期检测: 定期观察细胞形态,使用显微镜检查是否存在细菌污染。

 

二、真菌污染

来源:空气中的孢子。不洁的培养基和器具。

防治措施:
保持实验室清洁: 定期清洁实验室,尤其是培养区。
控制湿度: 实验室湿度应控制在40%-60%,避免高湿度环境。
使用抗真菌剂: 在培养基中加入适量抗真菌剂,以防真菌生长。

 

三、支原体污染

来源:污染的细胞株。未经检测的血清。实验人员。

防治措施:
定期检测: 使用支原体检测试剂盒,每隔一段时间检测细胞培养物。
选择合格血清: 使用经过支原体检测的血清。
筛选细胞株: 确保使用的细胞株已通过支原体检测。

 

四、病毒污染

来源:污染的血清。污染的细胞株。实验人员。

防治措施:
使用认证血清: 选择经过病毒检测和灭活处理的血清。
严格控制细胞来源: 使用经过病毒检测的细胞株。
遵循生物安全规范: 在操作过程中,遵循生物安全规范,防止病毒传播。

 

五、化学污染

来源:不纯的试剂。清洗剂残留。空气中的挥发性化合物。

防治措施:
使用高纯试剂: 选择高纯度、无污染的化学试剂。
彻底清洗器具: 确保培养器具清洗干净,无化学残留。
保持通风: 实验室应保持良好通风,减少挥发性化合物的积聚。

 

总结

细胞培养中的污染防治是一个系统工程,需要严格的操作规范和高质量的试剂保障。通过定期检测、保持环境清洁、选择无菌试剂等措施,可以有效减少污染的发生,确保细胞培养的成功率和实验结果的可靠性。

 

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