2024/9/18 14:10:00

根据细胞的类型、冻存条件和冻存液的配方等因素,细胞在-80℃冰箱中的保存时间有所不同。通常情况下,细胞可以在此温度下保存几个月至一年不等。然而,对于某些特定细胞类型和使用优化冻存液的情况下,其保存时间可能会更长。总体而言,-80℃冰箱适合短期保存细胞,若需要长期保存,则建议将其转移到液氮中以实现更稳定的保存状态。

 

细胞在-80℃冰箱中的保存时间取决于细胞类型和保存条件。一般来说,细胞在-80℃冰箱中可以短期保存几个月到半年,但长期保存效果不如液氮罐(-196℃)。

 

影响细胞保存时间的因素

细胞类型:不同细胞对低温的耐受性不同。较为“皮实”的细胞可以在-80℃保存半年,复苏后存活率仍能达到80%左右。而较为“娇贵”的细胞可能在-80℃保存一夜后,复苏存活率就会显著下降。

冷冻保护剂:使用适当的冷冻保护剂(如DMSO)可以减少冰晶对细胞的损伤,提高细胞复苏后的存活率。

降温速率:缓慢降温(每分钟1-3℃)有助于减少细胞内外冰晶的形成,保护细胞结构。

 

保存建议

短期保存:如果需要短期保存(几周到几个月),-80℃冰箱是可行的选择。

长期保存:对于长期保存,建议使用液氮罐(-196℃),因为在这种极低温度下,细胞的生化反应几乎完全停止,可以保存多年。

 

复苏注意事项

快速复温:从-80℃取出的细胞应迅速复温,以减少冰晶对细胞的损伤。

培养条件:复苏后的细胞应立即转移到适当的培养基中,并在适宜的条件下培养,以提高存活率。

 

细胞为什么能在液氮中可以长时间保存?而不能在-80℃冰箱中长期保存?

-80℃冰箱中保存细胞不能长期保存的主要原因是在这一温度下,细胞仍会消耗能量,且细胞内外的溶质未能完全平衡,细胞内酶活性仍未完全停止。此外,可能发生冻融损伤等情况,如停电、温度波动等因素可能对细胞造成损伤。

相比之下,液氮的极低温度(-196℃)可以有效阻断细胞的新陈代谢活动,将细胞内外的水分子固化,避免冰晶形成对细胞结构的伤害,从而实现细胞长期保存。因此,为了维持细胞的活性和完整性,一般建议将细胞在-80℃冰箱预冷后转移到液氮容器中进行长期保存,以确保细胞在稳定和无损伤的状态下得以保存。

细胞在-80℃冰箱中不能长期保存,而在液氮中可以长时间保存,主要原因在于温度对细胞代谢和冰晶形成的影响。

 

-80℃冰箱中的保存

在-80℃的温度下,细胞的代谢活动虽然大幅减缓,但并未完全停止。这意味着细胞内的一些生化反应仍然在缓慢进行,长期下来会导致细胞损伤和死亡。此外,-80℃的温度不足以完全防止冰晶的形成,冰晶会破坏细胞膜和细胞器,导致细胞不可逆的损伤。

 

液氮中的保存

液氮的温度约为-196℃,在这种极低温度下,细胞的代谢和所有生化反应几乎完全停止,细胞进入一种被称为“玻璃化”的状态。这种状态下,细胞内外的水分不会形成冰晶,从而避免了冰晶对细胞结构的破坏。因此,细胞在液氮中可以保存多年甚至几十年,复苏后仍能保持较高的存活率和功能。

 

关键区别

温度:-80℃无法完全停止细胞代谢,而-196℃可以。

冰晶形成:-80℃下冰晶仍可能形成,损伤细胞;-196℃下细胞进入玻璃化状态,避免冰晶形成。

 

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