HE染色,即苏木精-伊红染色,是卵巢组织石蜡切片常用的染色方法。使用HE染色有助于观察组织切片中卵泡的形态结构,识别各种发育阶段的卵泡。小鼠HE染色卵泡可以根据以下标准进行分类:
一、根据卵泡发育阶段分类
1.初级卵泡:卵泡直径约20~40μm,卵泡细胞数量较少,颗粒细胞层较薄,卵泡生长速度较慢。
2.次级卵泡(也称二级卵泡):卵泡直径约40~100μm,卵泡细胞数量增多,颗粒细胞层加厚。
3.成熟卵泡:卵泡直径约100~200μm,卵泡细胞密集,颗粒细胞层明显,中心细胞(初级卵母细胞)清晰可见,卵泡液急剧增多,卵泡增大,直径可超过2厘米,卵泡壁变薄,卵泡向卵巢表面突出,即将排卵。
4.闭锁卵泡:从胎儿时期至出生后,整个生殖期,绝大多数卵泡在发育的各个阶段停止生长并退化,退化的卵泡称闭锁卵泡。初级卵母细胞自溶消失,死亡的卵泡细胞或颗粒细胞被巨噬细胞和中性粒细胞吞噬,透明带塌陷,存留一段时间后消失。
二、根据卵泡形态分类
1.圆形卵泡:卵泡轮廓圆形,边界清晰。
2.椭圆形卵泡:卵泡轮廓呈椭圆形,长轴与短轴比例约1:1。
3.扁平卵泡:卵泡轮廓扁平,面积较大,高度较低。
三、根据卵泡内部结构分类
1.单层卵泡:卵泡内部仅有一层卵泡细胞。
2.多层卵泡:卵泡内部有两层或以上的卵泡细胞。
3.囊性卵泡:卵泡内部出现液体积聚,形成囊性结构。
四、其他分类标准
1.血管分布:根据卵泡周围血管的分布情况,分为丰富、中等和稀少。
2.卵泡膜厚度:根据卵泡膜的厚度,分为薄、适中和厚。
3.卵泡细胞密度:根据卵泡细胞的密度,分为低、中和高。
请注意,卵泡的分类可能因实验目的、观察条件和研究需求的不同而有所调整。在实际操作中,研究人员通常会结合多种分类标准来全面描述和分析卵泡的特征。