流式细胞术是一种多功能的生物分析技术，它通过激光与细胞相互作用产生的散射光和荧光信号来分析和分选单个细胞。

这项技术使用多种荧光标记试剂，包括抗体、DNA染料和活性染料，广泛应用于生命科学的多个领域，如免疫监测、分子和细胞生物学研究。

1.传统流式细胞仪

通过流体学、光学和电子学三个关键系统实现细胞分析和分选。

流体学系统使用鞘液输送细胞至检测点，光学系统利用激光和光电探测器捕捉细胞的光散射和荧光信号，而电子系统将这些信号转换为数字数据。

多激光配置允许同时检测多个参数，而新型检测器如APD提升了检测的灵敏度。

这些技术的综合应用使得流式细胞仪能够进行复杂的多参数分析，适用于广泛的生物学和医学研究。

2.声聚焦细胞仪

利用超声波技术优化细胞的聚焦，提高样品处理量并减少堵塞，支持多激光和多荧光通道的复杂分析，增强了流式细胞术在细胞分析中的效能和灵活性。

3.细胞分选仪

是流式细胞仪的一种，专门用于基于特定参数纯化和收集细胞样本。

它们通过高频振荡产生滴液，并通过电荷分离技术将选定的细胞引导至收集容器。

细胞分选仪分为石英杯和空中射流两种类型，前者激光对准固定，易于设置，后者则需每日校准，但可延伸至小颗粒应用。

这些设备使研究人员能够根据多个参数综合分析选择需要分离的细胞亚群，广泛应用于细胞生物学研究和临床诊断。

4.成像流式细胞仪（IFC）

结合了流式细胞术的高速分析能力和荧光显微镜的精细成像技术，使得能够在单细胞和群体水平上同时进行形态学和多参数荧光分析。

这种技术特别适合于研究细胞信号传导、蛋白质共定位、细胞间相互作用、DNA损伤与修复等，尤其适用于需要精确定位细胞内蛋白质分布并分析大量细胞荧光表达的复杂实验。

通过IFC，研究人员能够获得更全面的细胞特性信息，推动细胞生物学研究的深入。

5.质谱细胞仪

通过结合飞行时间质谱技术与流式细胞术，使用重金属离子标记的抗体来标记细胞，实现细胞的检测和分析。

这种技术不依赖于传统的光散射检测，而是通过质谱分析来识别细胞，避免了荧光信号的光谱重叠和补偿问题。

尽管样品在检测过程中会被破坏，限制了其在细胞分选方面的应用，但它提供了一种独特的细胞分析方法，特别适用于需要高维度参数分析的复杂研究。

目前，已有多达40个通道的试剂可用于质谱细胞仪，预计随着技术的进一步发展，将有更多金属元素被纳入用于抗体标记，从而增加可检测的参数数量。

6.微球阵列分析仪

通过多重微球阵列技术，使得在小样本体积中分析大量分析物成为可能。

这些系统使用带有特定荧光标记的捕获微球和相应的报告分子，通过流式细胞仪进行检测，从而实现对特定分析物的定量分析，类似于进行多个ELISA实验。

小型流式细胞仪配备有多个激光和96孔板装载器，专门设计用于这种类型的分析，能够检测和区分具有不同荧光特性的微球组合，适用于高通量的生物分子检测和分析。

7.光谱细胞分析仪

是应对多参数流式细胞术中荧光素光谱重叠问题的一种新型解决方案。

它通过测量每个荧光素的全发射光谱并创建独特的光谱指纹，来识别和区分不同荧光素。

在分析过程中，这些光谱被解混，从而为每个荧光素提供清晰的信号，提高了数据的准确性。

这种方法正在逐步替代传统的带通滤光片检测方式，特别是在进行高维度流式细胞分析时，为研究人员提供了更精确的数据分析工具。

8.总结

总之，流式细胞术的不断进步和持续创新极大地增强了我们对细胞功能和相互作用的理解，为生物医学研究提供了强有力的工具。