PI(Propidium Iodide)是一种常用的核酸荧光染料,主要用于细胞凋亡或细胞坏死的检测。
以下是关于PI染色的详细信息:
一、原理:
1.PI不能透过完整的细胞膜,但能够透过死细胞和凋亡中晚期细胞的细胞膜而使细胞核染色。
2.进入细胞后,PI与DNA和RNA结合,荧光强度增强20-30倍。
二、应用:
1.细胞凋亡检测:PI常作为荧光探针用于检测细胞凋亡(apoptosis)或细胞坏死(necrosis)。
2.流式细胞分析:PI在流式细胞分析中常用,与其他染料如Calcein-AM、Hoechst 33258或Hoechst 33342联合使用,来区分凋亡早晚期细胞以及死细胞。
3.多色荧光染色:PI也常作为多色荧光染色的复染剂使用。
三、荧光特性:
PI与DNA结合后,可被488nm氩离子激光激发,发射波长较长,对其他检测通道的干扰较小。
四、注意事项:
1.PI对活细胞膜的渗透性较差,因此主要用于死细胞或凋亡中晚期细胞的染色。
2.在实验操作中,需要注意PI的浓度和染色时间,以避免非特异性染色。
总结来说,PI染色是一种重要的方法,用于检测和区分死细胞、凋亡细胞和正常细胞,广泛应用于细胞生物学和医学研究中。