2024/9/25 11:01:00

在WB(Western Blotting,蛋白质印迹)实验中,蛋白的提取与后续的电泳、转膜、显色等步骤是相对独立的,因此蛋白在提取后是可以暂时保存,并在后续时间点再进行电泳等后续实验的。

不过,为了确保实验结果的准确性和可靠性,提取后的蛋白需要妥善保存,并注意以下几点:

1.保持蛋白的稳定性:提取后的蛋白应立即进行分装,以避免反复冻融造成的蛋白降解。蛋白样品一般可置于-20℃或-80℃冰箱中保存,以保持其稳定性和活性。

 

2.加入稳定剂:在蛋白提取液中可以加入适量的蛋白酶抑制剂,以抑制蛋白酶的活性,防止蛋白在保存过程中被降解。

 

3.尽快进行实验:虽然蛋白可以在低温下保存一段时间,但为了确保实验结果的准确性,建议在蛋白提取后尽快进行后续的电泳等实验。长时间保存可能会导致蛋白的降解或修饰,从而影响实验结果。

 

4.蛋白定量:在提取蛋白后,应进行蛋白定量,以确定各样本的蛋白浓度。这有助于在后续实验中控制上样量,确保各样本间的可比性。

 

5.与SDS Loading Buffer混合:将定量后的蛋白与适量的SDS Loading Buffer混合,加热变性后,即可进行电泳。SDS Loading Buffer中的成分有助于蛋白在电泳过程中的稳定和分离。

 

综上所述,WB实验中蛋白可以提完后面再跑,但需要注意保存条件和保存时间,以确保蛋白的稳定性和活性。同时,在后续实验中应控制各步骤的条件,以获得准确可靠的实验结果。

 

 

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