一、检测原理差异
仪器类型 |
荧光光度计 |
超微量分光光度计 |
原理 |
利用物质吸收特定波长激发光后发射荧光信号,荧光强度与物质浓度成正比。 |
基于比尔-朗伯定律,测量样品对特定波长光的吸收或透射程度,吸光度与物质浓度成正比。 |
检测方式 |
需荧光染料或探针标记,通过荧光强度定量。 |
直接测量光吸收值,无需标记。 |
光源 |
高压汞灯/氙灯/激光,激发光波长固定。 |
LED/氙气闪光灯,覆盖紫外-可见光区。 |
二、灵敏度与样品需求
参数 |
荧光光度计 |
超微量分光光度计 |
灵敏度 |
高(pg级核酸检测) |
较高(ng级,但光程优化后可达pg级) |
样品量 |
1-10μL |
0.5-2μL(极低样品消耗) |
检测限 |
依赖染料特性(如Qubit可测0.2ng/μL DNA) |
2-15000ng/μL dsDNA(通过光程调整扩展范围) |
三、核心应用场景
荧光光度计 |
超微量分光光度计 |
优势场景: |
优势场景: |
局限性: |
局限性: |
四、技术进展与趋势
方向 |
荧光光度计 |
超微量分光光度计 |
灵敏度提升 |
开发新型荧光探针(如纳米材料增强信号) |
优化光程与算法,提升低浓度检测精度 |
自动化 |
集成自动进样器与数据分析软件 |
微型化与无线传输(如MicroDrop支持WiFi) |
多场景覆盖 |
多通道检测(如多色荧光同时定量) |
扩展检测波长(如185-910nm宽谱检测) |
五、选择决策指南
1.优先荧光光度计:
需区分DNA/RNA或检测低浓度样品(如qPCR模板定量)。
样品含杂质较多,需高选择性检测。
2.选择超微量分光光度计:
样品量极少(如临床活检样本)。
需快速常规检测(如实验室日常核酸质控)。
预算有限,追求操作简便性。
六、未来发展方向
1.荧光光度计:
与微流控技术结合,实现单细胞水平检测。
开发多模态检测(如荧光+拉曼联用)。
2.超微量分光光度计:
集成AI算法,自动优化测量参数。
开发便携式设备,适配现场检测需求。
通过理解两者原理差异、评估样品需求与实验目标,可科学选择仪器,提升实验效率与数据准确性。