无有机溶剂的乳脂去除试剂盒使用说明书
产品描述
无有机溶剂的乳脂去除试剂盒是一种专门用于去除人/动物全乳中脂类的试剂盒。它避免了传统有机溶剂萃取法（如Folch法）中氯仿等有毒溶剂的使用，同时确保乳蛋白在水相环境中沉淀，并能很容易地复溶于水相缓冲溶液中用于下游应用。
试剂盒组分
试剂盒通常包含以下主要组分：
1.缓冲液A：用于样品处理和脂类去除。
2.缓冲液B：用于进一步处理样品，促进脂类与蛋白质的分离。
3.其他可能包含的组分：如离心管、研磨杵等，具体根据试剂盒品牌和型号而定。
操作方法
以下是一个通用的操作指南，具体步骤可能因试剂盒品牌和型号的不同而有所差异，请务必参考具体试剂盒的说明书进行操作：
1.样品准备：
在离心管中加入全乳样品。如做预实验，推荐将适量全乳（如100μl）添加到离心管中。
2.初步处理：
向离心管中加入等量（如100μl）的缓冲液A，用吸头吹打混匀，并在冰上孵育一段时间（如10分钟）。
3.离心分离：
在室温下，以一定转速（如16,000Xg）离心一段时间（如5分钟）。离心后，上清液中含有乳球蛋白和乳清蛋白（LA部分），沉淀则包含酪蛋白和其他蛋白质以及部分脂质。
4.进一步处理沉淀：
向沉淀中加入适量PBS涡旋震荡重悬，然后加入缓冲液B，大力旋涡混匀并室温孵育一段时间（如2-3分钟）。
5.再次离心分离：
在室温下，以相同转速离心相同时间。离心后，脂相（上部）和沉淀（酪蛋白部分）应清晰可见。
6.收集和处理组分：
将水相和脂相倒入新的离心管中，用纸巾擦净管壁去除附着的油脂。沉淀可在水相缓冲液中重悬，如PBS，酪蛋白很容易溶解。
7.进一步去除残留脂质（可选）：
将重悬的沉淀在较高转速下（如10,000Xg）离心一段时间（如5分钟），以进一步去除残留的脂质。
注意事项
1.操作前准备：使用前仔细阅读整个操作说明，并用力摇匀缓冲液B几秒钟。
2.温度控制：所有离心步骤均需在4-8度进行，以确保样品的稳定性和实验结果的准确性。
3.样品量控制：根据实验需求调整样品量，但请确保不要超过试剂盒推荐的样品量上限。
4.附加材料准备：除了试剂盒提供的组分外，还需要准备台式离心机、1X PBS等附加材料。
5.实验重复与对照：为了确保实验结果的可靠性，建议进行多次重复实验并设置适当的对照。
应用领域
无有机溶剂的乳脂去除试剂盒可以在不进行热处理的情况下去除全乳中大部分脂质，适用于蛋白质分析或蛋白质纯化等研究领域。分离出的脂质组分也可用于进一步的分析，如脂源性研究。
