新鲜/冷冻组织单细胞悬液分离试剂盒使用说明书
1.产品描述
新鲜/冷冻组织单细胞悬液分离试剂盒是一种简单、快速、高效的工具，用于从新鲜或冷冻的组织中获取优质细胞悬浮液。该试剂盒无需特殊仪器，利用化学和物理分离机制，可在短时间内获得具有较高完整性和活性的细胞悬液，适用于流式细胞术分析（FACS）、核酸纯化等多种后续实验。
2.试剂盒组分
组织分离液：用于裂解组织和释放细胞。
1.5ml 离心管：用于装载和处理组织样本。
研磨杵：用于研磨组织，促进细胞释放。
其他可能包含的组分：如FACS缓冲液（需自行配制，通常包含1XPBS、5%牛血清白蛋白、0.01%叠氮化钠）、细胞筛等。
3.储存条件
试剂盒应常温运输，并在4℃条件下储存。
4.操作方法
样品准备：
取10-30毫克的组织样本，置于试剂盒提供的1.5ml离心管中。
注意：不建议使用自备的离心管，因为可能与试剂盒提供的研磨杵不匹配。
5.组织处理：
加入200μl预冷的组织分离液，覆盖组织样本。
在冰上孵育5-10分钟。
使用提供的研磨杵反复扭转研磨组织100-200次（约2-3分钟）。
研磨杵可重复使用，用清水清洁后，用纸巾擦干即可。
6.离心与洗涤：
研磨后，以500Xg离心3分钟，弃去上清液。
用研磨杵将沉淀扭转研磨100-150次。
加入1ml的FACS缓冲液，将样品再研磨几次重悬。
7.细胞悬液过滤与重悬：
用1ml的吸头上下吹打10-20次，重悬细胞。
将细胞悬液通过40-100μm的细胞筛过滤（细胞筛的孔径根据最终所需细胞大小选择）。
用低速离心（500Xg，3分钟）收集细胞。
再用适量的FACS缓冲液重悬细胞。
注意：不要使用PBS重悬细胞，因为细胞非常脆弱。如果细胞不在FACS缓冲液或其他含血清的缓冲液中重悬，细胞的活力将受到显著影响。
注意事项
1.操作环境：所有操作应在无菌条件下进行，以避免微生物污染。
2.试剂处理：尽量避免试剂的反复冻融，建议到货后分装保存。
3.细胞活力：在整个操作过程中，应尽可能保持细胞的低温和无菌环境，以维持细胞的活力和完整性。
4.实验重复：为了确保实验结果的可靠性，建议进行多次重复实验。
应用领域
1.流式细胞术分析（FACS）：用于细胞表型分析、细胞周期分析等。
2.核酸纯化：用于提取细胞内的DNA、RNA等核酸物质。
3.其他应用：如细胞培养、药物筛选等。
总结
新鲜/冷冻组织单细胞悬液分离试剂盒提供了一种简单、快速、高效的方法来获取优质细胞悬浮液，适用于多种后续实验。在操作过程中，应严格遵守说明书中的步骤和注意事项，以确保实验结果的准确性和可靠性。
