一、贴壁问题
1.问题分析：
THP-1 细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况，可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞。
当贴壁细胞比例高于 20% 时，说明细胞生长环境有异常。
2.解决方法：
检查培养箱的温度及 CO2 浓度，确保符合 THP-1 细胞的生长要求（通常为 37℃，5% CO2）。
检查培养基的成分，确保培养基的酸碱度、营养成分等符合 THP-1 细胞的生长需求。
考虑使用非 TC 处理过的培养瓶，这种培养瓶不利于细胞贴壁。
如果更换了血清品牌，可能会导致 THP-1 细胞贴壁比例增加，此时可以尝试更换回原来的血清品牌或调整血清比例。
二、聚团问题
1.问题分析：
THP-1 细胞在密度较稀时，有少量细胞聚团属于正常现象，不建议将聚团的细胞吹散，等待密度高时，细胞会自然分散开。
当细胞密度高时，聚团细胞比例高于 30%，并且细胞团呈糜烂状，细胞之间界限不清，胞体质膜有溃烂感，这种情况下的细胞聚团是异常的。
2.解决方法：
对于少量聚团，无需特殊处理，等待细胞密度增加后自然分散。
对于严重聚团，可以优先排查营养体系，如更换血清品牌或增大血清比例（不超过 20%），以改善细胞生长环境。
避免过高的离心速度，以免对细胞造成损伤。
在细胞密度较高时，通过自然分散或适度吹散细胞团块来改善聚团现象。
三、复苏问题
1.问题分析：
THP-1 细胞复苏后通常需要 3-5 天恢复状态，复苏初期细胞生长缓慢且会有部分细胞破碎，出现黑色细胞碎片。
THP-1 细胞对冻存密度有依赖，冻存密度过低会影响复苏存活率。
2.解决方法：
确保冻存时细胞密度足够（建议 5×106-107/ml），以提高复苏存活率。
复苏后 48 小时内尽量避免对细胞进行操作，让细胞有足够的时间恢复状态。
复苏初期出现的少量细胞碎片不影响细胞正常生长，待细胞恢复正常生长速度后可用半换液法稀释碎片。
如果复苏后细胞状态不佳，可以考虑重新冻存一批状态良好的细胞，并优化复苏流程。
