一、CCCadvanced™ FN1 无异源耗材的核心优势
1.合成基质表面
包被预制的纤连蛋白衍生基序（FN1 motifs），模拟天然细胞外基质（ECM）的细胞附着点，支持无血清、无异源成分的培养体系。
2.无异源成分
完全避免动物源或人源成分，降低异种蛋白污染风险，符合临床级干细胞培养标准。
3.即用型设计
无需额外包被或预处理，开箱即用，显著提升实验效率。
4.长期扩增能力
支持人多能干细胞（hiPSC/hESC）稳定传代 25 次以上，扩增后细胞保留三胚层分化潜能及基因组完整性。
5.兼容性广
兼容无血清培养基（如E8培养基）、多种解离试剂（Accutase®、TrypLE™），适配自动化培养流程。
二、标准操作流
1. 复苏与接种
基质准备：直接使用无菌、独立的FN1包被培养板（无需额外包被）。
细胞复苏：
快速解冻冻存管（37℃水浴，1-2分钟），逐滴加入预热培养基。
离心后重悬细胞，接种至FN1包被培养板（密度：1×10⁶ cells/mL）。
2. 培养条件
培养基：使用无血清、无异源成分培养基（如Gibco® Essential 8™）。
环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度。
换液：每日更换全部培养基，维持营养稳定。
3. 传代步骤
消化：
使用无酶解离液（如Gentle-Stem™）或胰酶替代物（TrypLE™），37℃孵育2-5分钟。
显微镜下观察，待细胞克隆边缘出现间隙时终止消化。
分瓶：轻柔吹打形成细胞团块（避免单细胞），按1:3-1:5比例传代。
4. 冻存流程
冻存液：使用无血清冻存液（如StemCell™ CryoStem™）。
降温：4℃平衡30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转入液氮长期保存。
三、关键注意事项
1.污染防控
全程无菌操作，独立包装耗材降低支原体污染风险。
2.细胞状态监测
每日观察细胞形态及克隆密度，避免过度拥挤（融合度＞80%时传代）。
3.培养基稳定性
现配现用无血清培养基，避免反复冻融（建议分装后-20℃保存）。
4.分化控制
长期培养需定期检测干性标志物（如OCT4、SOX2），确保未分化状态。
四、技术优势对比
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指标 |
CCCadvanced™ FN1 |
传统基质（如Matrigel） |
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成分 |
完全合成，无异源成分 |
含动物源成分（如小鼠肿瘤提取物） |
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批次一致性 |
高（预制标准化基质） |
低（天然基质批次差异大） |
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长期扩增 |
支持25代以上 |
通常10-15代后出现衰老 |
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操作复杂度 |
即用型，无需包被 |
需繁琐包被步骤 |
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临床转化 |
符合GMP要求 |
存在异种蛋白污染风险 |
五、应用场景拓展
1.基因编辑：结合CRISPR-Cas9技术，在FN1表面进行高效基因操作。
2.类器官培养：支持多能干细胞向脑、肝等类器官分化。
3.药物筛选：在无异源环境中评估候选药物对干细胞增殖/分化的影响。
通过优化表面化学与培养流程，CCCadvanced™ FN1 为人多能干细胞研究提供了更安全、高效的技术平台，助力干细胞治疗与再生医学的发展。
