一、细胞培养板的选择方法
1. 底部形状
平底培养板：
适用场景：所有类型细胞培养，尤其是贴壁细胞。
优势：便于显微镜观察、吸光度检测（如MTT实验），底面积明确，液面高度一致。
圆底培养板（U型/V型）：
适用场景：特殊实验需求，如免疫学细胞接触刺激实验、细胞杀伤实验。
特点：细胞因重力作用聚集，便于液体吸干，但一般不用作常规培养。
2. 孔数选择
6孔、12孔、24孔：
适用场景：需要较多细胞样本量的实验（如流式检测、蛋白分析）。
96孔、384孔：
适用场景：高通量实验（如药物筛选、毒性测试），支持自动化操作。
3. 表面涂层
TC处理：促进贴壁细胞黏附和增殖。
超低吸附处理：抑制细胞贴附，适合悬浮细胞培养。
4. 颜色
透明：适合相差显微镜观察。
白色：提高冷光信号反射率（如发光检测）。
黑色：吸收激发信号，减少荧光干扰（如荧光检测）。
5. 材质
塑料培养板：
优势：成本低、易使用，适合大部分实验。
注意：选择标示“Tissue Culture (TC) Treated”以确保细胞贴壁。
玻璃培养板：
优势：透明度高、耐高温，适合特殊实验（如高温处理、荧光成像）。
二、常见问题及解答
1. 污染问题
细菌污染：
现象：培养基混浊，pH值下降（酚红变黄或橙）。
处理：立即弃掉污染培养物，彻底清洁消毒实验环境。
霉菌污染：
现象：显微镜观察分支丝状结构，培养基发绿或发黑。
处理：弃掉污染培养物，使用抗真菌剂清洁环境。
支原体污染：
检测：荧光染色法（DAPI/Hoechst）或PCR检测。
处理：使用支原体去除试剂，严重污染时丢弃细胞株。
2. 细胞生长问题
细胞不贴壁：
可能原因：胰酶消化过度、支原体污染、培养基pH值过碱。
解决方案：缩短胰酶消化时间，检测支原体，调整培养基pH值。
细胞生长缓慢：
可能原因：培养基成分不足、血清质量差、细胞老化。
解决方案：换用新鲜培养基，增加血清浓度，启用新保种细胞。
细胞分布不均：
可能原因：细胞悬液未混匀、震荡过猛。
解决方案：接种前混匀细胞悬液，使用滴头缓慢加入。
3. 培养液问题
pH值变化过快：
可能原因：CO₂浓度不当、培养基盐浓度错误。
解决方案：调整CO₂浓度，检查培养基配方。
培养液出现沉淀：
可能原因：洗涤剂残留、细菌污染。
解决方案：加热培养液，丢弃污染培养物。
4. 其他问题
边缘效应：
现象：培养板周边孔与内部孔细胞生长差异。
解决方案：增加培养液体积，使用边缘孔作为对照。
蒸发问题：
现象：培养液蒸发导致细胞死亡。
解决方案：保持培养箱内湿度100%，使用无菌蒸馏水水槽。
三、选择建议
1.实验目的优先：根据实验需求（如细胞类型、检测手段）选择合适规格和涂层的培养板。
2.质量控制：选择知名品牌或经过验证的产品，确保无菌性和一致性。
3.成本效益：小规模实验可选用塑料培养板，长期观察或高温实验选用玻璃培养板。
