病毒的超低温保存法是一种适用范围广泛且有效的微生物保存方法，它利用超低温环境来抑制病毒的活性，从而延长其保存时间。
以下是关于病毒超低温保存法的详细介绍：
一、保存原理
在超低温环境中，如液氮中，病毒的活性会受到极大抑制，新陈代谢几乎停止，因此可以长期保存。这种方法有助于维持病毒的稳定性，减少变异率，并长期保持原种的性状。
二、保存条件
1.温度：通常指在-60℃至-196℃的超低温环境下保存。液氮的沸点为-196℃，是常用的超低温保存介质。
2.保护剂：在超低温保存时，通常需要加入保护剂来防止病毒在冷冻过程中受到损伤。常用的保护剂包括甘油、二甲亚砜（DMSO）、脱脂牛奶溶液、5%蔗糖、血清等。这些化学试剂进入细胞内可避免内膜的冷冻损伤。
三、保存步骤
1.准备病毒悬液：将病毒悬浮在含有保护剂的液体中，确保病毒浓度适中。
2.分装：将病毒悬液无菌分装到小管或安瓿中，以便长期保存。建议分装，因为冻融可导致许多病毒灭活。
3.冷冻：将分装好的病毒悬液以较慢的冷冻速率（如1℃/分钟）冷冻至超低温环境，如液氮中。
4.保存：将冷冻好的病毒悬液贮存在液氮罐或其他超低温保存设备中。在长期贮存的过程中，必须经常注意补充液氮，以维持贮存温度。
四、注意事项
1.无菌操作：整个保存过程必须在无菌条件下进行，以防止病毒污染和失活。
2.定期监测：在长期保存过程中，应定期监测病毒的活性和状态，以确保其保存质量。
3.复苏操作：当需要使用保存的病毒时，应小心操作复苏过程。迅速将样品解冻可以减少活力的丢失，通常是将封口的小管迅速放入37℃的水中，直至所有的冰融化。
五、应用范围
病毒的超低温保存法适用于各种需要长期保存的病毒样本，包括研究用病毒株、疫苗生产用病毒株等。这种方法在生物医学研究、疫苗开发、疾病诊断等领域具有广泛的应用前景。
