冷冻干燥保藏菌种技术
优点：
1.保藏时间长：可达数年甚至数十年。
2.菌种活力高：复苏后菌种生长良好，遗传特性稳定。
3.适用范围广：适用于大多数细菌、放线菌、病毒、噬菌体、立克次体、部分丝状真菌和酵母等的中长期保藏。
缺点：
1.操作复杂：步骤较多，需要专业设备和技术。
2.成本较高：设备和耗材成本较高。
操作步骤：
1.安瓿管准备：选用耐温度骤变、耐压、管壁厚度均一的中性玻璃安瓿管，清洗后灭菌备用。
2.保护剂选择与配制：根据微生物菌种的类型选择合适的保护剂，如脱脂乳、甘油、二甲亚砜等，并进行灭菌处理。
3.菌悬液制备：在最适宜的培养条件下，将微生物培养至静止期或成熟期，与保护剂混合均匀，制备成菌悬液。
4.分装与预冻：在无菌条件下，将菌悬液分装到安瓿管中，置于-80℃冰箱中预冻。
5.冷冻干燥：将预冻后的安瓿管置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥处理。
6.真空封口：冷冻干燥完毕后，取出安瓿管，在真空条件下进行熔封。
7.保藏与检测：封口完全的冷冻干燥管应低温避光保藏，并定期进行存活率、生产能力、形态变异、杂菌污染等检测。
液氮保藏菌种技术
优点：
1.保藏效果好：菌种存活率高，遗传特性稳定。
2.操作简便：步骤相对简单，易于操作。
3.适用范围广：适用于各种微生物菌种的长期保藏，特别是稀有或特殊的菌种。
缺点：
1.设备昂贵：液氮罐和冷冻设备成本较高。
2.安全隐患：液氮具有低温危险，操作时需注意安全。
操作步骤：
1.安瓿管或冻存管准备：选用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管或螺旋口的塑料冻存管，清洗后灭菌备用。
2.保护剂准备：根据微生物菌种的类型选择合适的保护剂，如甘油、二甲亚砜等。
3.菌悬液制备：在最适宜的培养条件下，将微生物培养至静止期或成熟期，与保护剂混合均匀，制备成菌悬液。
4.预冻：将装有菌悬液的冻存管置于程序控温降温装置或分段降温装置中，控制冷冻速度，使样品冻结到-35℃。
5.保藏：将预冻后的冻存管置于液氮罐中保藏。
6.复苏：从液氮罐中取出冻存管后，应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏，并将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
选择建议
对于需要长期保藏且对菌种活力要求较高的菌种，可以选择冷冻干燥保藏法。
对于需要快速保藏且操作简便的菌种，可以选择液氮保藏法。
