一、准备工作
1.动物选择:
选用健康、适龄(大鼠6-8周龄,小鼠4-6周龄较适宜)的动物。
提前让动物适应实验环境,减少应激反应。
2.器材准备:
使用合适的固定器(如小鼠尾静脉注射架、大鼠固定盒)固定动物。
准备适当规格的注射器(如1mL或更小)和针头(小鼠常用29-31G,大鼠常用25-27G)。
加热设备(如白炽灯、热水袋)用于扩张尾部血管。
二、操作步骤与技巧
1.固定与安抚:
将动物牢固但轻柔地固定在固定器中,避免过度挣扎。
可通过轻抚动物头部或给予少量食物安抚情绪。
2.尾部处理:
用温水(40-45℃)浸泡尾部或使用加热设备照射尾部,使血管扩张。
用75%酒精棉球擦拭尾部,消毒并增强血管可见度。
3.血管识别与定位:
识别尾部两侧的静脉(小鼠尾静脉有三根,左右两侧和背侧各一根;大鼠尾静脉较粗)。
选择清晰、无分支的血管段作为注射点。
4.注射操作:
针头斜面朝上,与尾部呈15-30°角进针。
针头刺入后,若感觉有落空感且回抽无血,可缓慢推注药液。
注射过程中保持针头稳定,避免药液渗漏。
5.注射后处理:
注射完毕后,迅速拔出针头,用棉球轻压注射点止血。
观察动物状态,确保无异常反应。
三、注意事项
1.避免反复穿刺:
若首次穿刺失败,应拔出针头,重新选择注射点。
反复穿刺易导致血管损伤和药液渗漏。
2.控制注射速度:
注射速度不宜过快,以免动物心脏负担过重。
缓慢推注药液,确保药液顺利进入血管。
3.动物福利:
操作过程中尽量减少动物痛苦和应激反应。
注射后给予动物适当照顾和观察。
4.操作者技能:
尾静脉注射需要一定技巧和经验积累。
初学者可在导师指导下进行练习,提高成功率。