一、样品前处理
1.样品准备：
对于乳制品，如牛奶，需称取一定量（如 50mL）的样品，并加热至适宜温度（如 35℃~37℃）以去除乳脂及沉淀。
对于乳粉等固体样品，需称取适量（如 10g）样品，用预热的水溶解并定容至一定体积（如 100mL），然后离心去除乳脂及沉淀。
2.样品均质化：
确保样品中黄曲霉毒素 M1 分布均匀，以便后续提取。
二、提取
1.选择提取溶剂：
常用乙腈、甲醇等有机溶剂进行提取。
2.提取操作：
将适量提取溶剂加入样品中，通过振荡、搅拌或超声波辅助提取等方法，将黄曲霉毒素 M1 从样品中提取出来。
三、净化
1.选择净化方法：
常用固相萃取（SPE）、液-液萃取（LLE）等方法进行净化。
2.净化操作：
对于 SPE 方法，需将提取液通过含有特定吸附剂的固相萃取小柱，以去除干扰物质。
对于 LLE 方法，需利用不同溶剂对黄曲霉毒素 M1 和干扰物质的溶解度差异进行分离。
四、浓缩与定容
1.浓缩：
通过旋转蒸发、氮吹等方法将净化后的提取液浓缩至一定体积。
2.定容：
用适当溶剂（如乙腈水溶液）将浓缩后的提取液定容至适宜体积，以便后续检测。
五、仪器检测
1.选择检测方法：
常用高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）等方法进行检测。
2.检测操作：
对于 HPLC 方法，需将定容后的样品注入高效液相色谱仪中，通过色谱柱分离后，用检测器（如荧光检测器）进行检测。
对于 LC-MS 方法，样品先经过液相色谱分离，然后进入质谱仪进行检测。
六、结果分析
1.绘制标准曲线：
用一系列已知浓度的黄曲霉毒素 M1 标准溶液绘制标准曲线。
2.计算样品浓度：
根据样品检测得到的峰面积或峰高，从标准曲线上读出对应的黄曲霉毒素 M1 浓度。
3.结果判定：
将计算得到的样品浓度与法定限量进行比较，判定样品是否合格。
七、注意事项
1.样品处理过程：
避免光线直射样品，以免影响黄曲霉毒素 M1 的稳定性。
试样过亲和柱时控制过柱流速稳定。
氮气蒸发洗脱液时，不要蒸干，以免损失黄曲霉毒素 M1。
2.仪器与试剂：
确保所用仪器（如高效液相色谱仪、质谱仪等）性能稳定、校准准确。
使用符合要求的试剂和溶剂，避免引入干扰物质。
3.质量控制：
在检测过程中进行空白实验、阴性对照实验和阳性对照实验，以确保检测方法的准确性和可靠性。
