明明是一瓶优质的血清
偏偏出现沉淀
和血清质量有关吗？
会影响细胞培养吗？
如何避免沉淀？
出现沉淀如何处理？
问：血清中沉淀太多，是不是质量不好啊？这些沉淀是什么？
答：这些只不过是血清中的纤维蛋白而已，随着时间推移而析出产生，本身没有什么营养价值。
问：那为什么有的血清沉淀多，有的沉淀少？
答：这主要由2个因素：
1：保存的时间，血清刚生产后是没有沉淀的，时间越久，析出的沉淀越多；
2：采血后保存运输环节，血清的每一次冻融，都会析出蛋白沉淀，因此，冻融次数多的原料血清，成品后反而沉淀少。
现在我们一起来看看国产与进口血清沉淀的特点
国产血清：沉淀很少，就是因为生产后到客户手上的时间很短，同时，原料保存运输过程中温度不恒定，甚至冻融的次数较多。
进口血清：沉淀相对较多，这和保存时间较长，采血后整个运输环节比较规范有关。
所以说，沉淀的多少，和血清质量根本无关。那么，遇到沉淀较多的血清，怎么处理比较方便？
1：将冷冻保存的血清取出后，置4℃冰箱静止过夜。
2：待血清融化后，上下颠倒，轻轻混匀，继续4℃2-3小时。
3：轻轻吸取上层血清，分装，余底下50ml左右。
4：低速离心5分钟，去掉沉淀。
小贴士：
此外，我们要区分血清沉淀和血清污染，前者静止一段时间后，上清是清澈透亮的，后者始终是有一定浊度的，两者对比更加明显。血清沉淀的多少是血清本身决定的，而污染往往是分装过程中发生，还有一个不为大家知道的原因——运输环节。血清运输过程中融化了（特别是夏天)，在不停的颠簸挤压下，污染概率大大提高，初步估算为0.5%。
血清沉淀是什么？
血清中经常会出现肉眼可见的沉淀，其成分有多种类型，产生的原因有很多，主要有纤维蛋白、磷酸钙还有一些其它成分。
1. 纤维蛋白（Fibrin）
血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中，血清采集、过滤（3 次 0.1 μm过滤）和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原（Fibrinogen）处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。
下图是血清因反复冻融而造成纤维蛋白原的凝集
2. 磷酸钙（Calcium Phosphate）
这是一种常见的沉淀成分，通常会造成血清出现云雾状浑浊。当产品在 37℃保存时，这种现象尤其明显，在倒置显微镜下可观察到小黑点的存在。这些小黑点在布朗运动的作用下四处游动，常被误认为是微生物污染。
3. 其他成分（Other）
血清中的其他成分也会形成沉淀，例如胆固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。
血清沉淀会影响细胞培养吗？
1. 细胞生长
我们在出厂前都会对血清进行一系列质检测试，确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明，其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。
2. 怀疑污染
磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧。一般情况下，当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时，常将其存放在 4℃冰箱中观察，并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多，反而会使血清更加浑浊，进而误以为存在血清污染。并且，在倒置显微镜下，可在血清中观察到四处游动的小黑点（磷酸钙颗粒的布朗运动），更容易使人误以为存在微生物污染。
为防止这类误解的产生，我们不建议客户培养血清来验证是否存在污染，而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养，以观察是否有细菌的增殖。并且，进行革兰氏染色，并在油镜（100 X 10 倍）下观察可直接确认是否存在微生物污染。
怎样操作可以尽量避免沉淀出现？
1. 正确解冻
首先，应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于 4℃冰箱缓慢解冻，最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻，则非常容易产生沉淀。在解冻过程中，请注意时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。为避免反复冻融，建议您将血清分装使用。
2. 使用和保存注意事项
血清沉淀很难预测和避免，出现沉淀后也无需担忧，这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能：
1) 热灭活；
2) 37℃培养；
3) 反复冻融；
4) 伽马射线照射；
5) 2-8℃长期保存；
6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中（温度不稳定）。
血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象，这一点可以在各品牌官方网站上关于沉淀问题的声明上得到证实。
总 结：
血清产品中出现沉淀属于常见现象，但不会影响血清的品质，对细胞培养而言也是没有任何问题的，大家可以放心使用！
